Question

为什么聚丙烯酰胺凝胶电泳小分子先出来？不适合凝胶过滤一样都是分子筛原理吗？看过你以前的回答 谢谢啦

Answer 1

楼主，一楼关于凝胶过滤讲解得很详细也很准确。和凝胶电泳相比，两者凝胶是不相同的，凝胶过滤常用的凝胶是葡聚糖或是琼脂糖，也们在形成网状结构的同时，这些网状结构上还含有很多孔穴，待分离的混合物经过凝胶时，孔径小于孔穴的物质进入孔穴，在孔穴间穿梭，流程长，后流出，孔径大的不进入孔穴，直接在网状结构的间隙中流动，流程短，先流出。而凝胶电泳最常用的凝胶是聚丙烯酰胺凝胶，这种凝胶形成网状结构，虽然分离中存在分子筛效应，但是还存在电荷效应（电泳分离化合物的原理是基于物质的大小和所带的电荷），而且电荷效应占了主导地位，凝胶主要是给它提供了个支持的介质，所以小分子电泳时，阻力小，移动得快，分子量越大，移动得越慢，电泳结束后，小分子的化合物在最前面，分子量最大的位于最后面，由此将混合物分离开来。楼主，凝胶电泳，你可以参考这个
http://baike.baidu.com/view/320392.htm，有助于理解，希望能帮到你！

Answer 2

凝胶层析的固定相是惰性的珠状凝胶颗粒，凝胶颗粒的内部具有立体网状结构，形成很多孔穴。

当含有不同分子大小的组分的样品进入凝胶层析柱后，各个组分就向固定相的孔穴内扩散，组分的扩散程度取决于孔穴的大小和组分分子大小。

比孔穴孔径大的分子不能扩散到孔穴内部，完全被排阻在孔外，只能在凝胶颗粒外的空间随流动相向下流动，它们经历的流程短，流动速度快，所以首先流出；

而较小的分子则可以完全渗透进入凝胶颗粒内部，经历的流程长，流动速度慢，所以最后流出；分子越大的组分越先流出，分子越小的组分越后流出。

聚丙烯酰胺凝胶电泳不是通过凝胶颗粒内部的孔穴保留小分子的，
聚丙烯酰胺凝胶是通过三维网状结构分离，所以小分子先出，大分子比较慢出。
不一样的原理