Question

分子生物学实验室一般有哪些注意事项

Answer 1

目前，分子生物学飞速发展，分子生物学相关的理论和技术已深入到生命科学的各个领域，一些常用的技术，如基因组DNA的分离纯化，质粒DNA的抽提及纯化，RNA的提取，PCR扩增，Southern blot等成为分子生物学研究的强有力工具，为分子生物学的发展起了巨大的推动作用，然后，这些实验操作技术都涉及到氯仿、DEPC、同位素等有毒有害或具放射性的物质，对环境和人身安全也造成巨大的威胁。因此，弄清这些有害有毒物质的作用，加强实验室安全管理，建立良好的制度和处理，保证分子生物学实验室成为真正的科研阵地。
放射性物质的处理：放射性同位素技术具有灵敏、简便和廉价等优点，在分子生物学实验室应用普遍，但由于放射性同位素的辐射会给人体造成损伤，如果使用不当或操作不规范，会造成环境污染，甚至损伤人员。在进行同位素操作时一定要注意个人防护，包括使用隔离、专用衣帽手套及防护背心、挡板等。对放射性同位素的污染进行安全性教育，实行责任到人的做法，对放射性物质统一保管、集中存放、集中处理的做法。在定购同位素时，根据需要量进行订购。α-31p半衰期为14.5天，在southern blotting应用较广，是危害较大的放射性物质。DNA杂交时，在探针标记、洗膜等几个阶段都涉及同位素。对含α-31p固体废物，放入铁皮箱10个半衰期(约半年)后埋到指定的地点：对于含α-31p浓度较高的液体废物(如首次洗膜液)，在厚实的朔料桶放置8个半衰期后倒入专用的下水道；含α-31p浓度较低的液体废物(如二、三次洗膜液)，则直接倒入专用的下水道。

4.3常见的有毒物质的处理：溴化乙锭、Trizol、丙烯酰氨、DEPC、甲酰氨等毒性高、环境危害大的物质，分类收集后统一处理。

4.3.1 EB(Ethidiunl bromide，溴化乙锭)：EB是一种强烈诱变剂并有中度毒性，应戴手套操作，对于含有EB的溶液也不应直接倒下水道，用后妥善净化处理：EB含量大干0.5μg/ml溶液先用水将EB浓度稀释至0.5μg/ml以下，每100ml溶液加入100mg活性碳。不时轻轻摇荡混匀，室温放置1小时，滤纸过滤将活性碳与滤纸密封在塑料袋中作为有害废物丢弃。或用专用一次性染料清除袋(Gene有限公司)吸附过夜，再焚烧袋子即可。EB接触物，如抹布、枪头等埋入地下。

4.3.2 Trizol：提取组织和细胞RNA的一种重要试剂，在提取RNA时一定要在通风进行。如皮肤接触Trizol，请立即用大量去垢剂和水冲洗，废液埋入地下。

4.3.3 DEPC(Diethylprocarbonate，二乙基焦碳酸酯)：RNA酶的强抑制剂，一种潜在的致癌物质。操作时戴口罩。在通风橱中进行。沾到手上立即冲洗，废液通过废液道排泄。

4.3.4 CHCl3(ChIoroform，氯仿)：常用于DNA和RNA提取，对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有强烈的刺激作用和腐蚀性，易损害肝和肾。操作时戴手套在通风橱里进行，废液收集后埋入地下。

4.3.5 Acrylamide(丙烯酰胺)：DNA测序、SSR及蛋白质分离等技术中作电泳支持物，具神经毒性，聚合后毒性消失。操作时戴手套在通风橱内进行，聚合后的聚丙烯酰胺凝胶没有毒性，可随普通垃圾一起扔掉，千万不要倒入下水道。