Question

高中生物基因工程题，高手请进，急急急

将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。
请根据以上图表回答下列问题。
(1）图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？（2）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判定。
①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_________种DNA片断。
②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到_________种DNA片断。

20.答案（1）否 (2）①2 ②1
求详解，谢谢
请顺便解释一下此图，我图没看懂~
查看图时刷新一下就行了~
为什么没有SmaⅠ酶可以切的地方？怎么用表二判断？？？

Answer 1

首先，第一问，DNA连接酶对两端序列没有专一性要求。DNA被切开，暴露的单链部分的碱基会根据碱基互补配对原则在DNA连接酶的督促下又联合成双联，这样就连一起了。
图中目标基因的X端和载体质粒的M端都是被ECORI酶切割后暴露的单链部分。当目标DNA片段镶嵌到质粒中时，X端与M端就配对成双连，这样就形成了完整的新的又能被ECORI酶切割的一段序列。再加上质粒本身就有没有被破坏的PSTI酶可以切割的序列。所以重组质粒有两个可以切的地方：EcoRⅠ酶对应序列、PstⅠ酶对应序列。
用EcoRⅠ和PstⅠ酶切时，两种酶都有对应可以切的序列。所以重组质粒被切两刀！得到两种产物！采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，只有EcoRⅠ酶可以切的地方，没有SmaⅠ酶可以切的地方，所以重组质粒只被EcoRⅠ切了一刀，得到一种产物！

Answer 2

hellolele00回答有偏差了，更正
第一问应该这样解释，DNA连接酶的作用时缝合限制酶切割的黏性末端，恢复磷酸二脂键，对所连接的DNA碱基序列没有专一要求。
第二问
由图一可看出质粒T上存在着EcoR1和Pst1的切割位点（分别是M和N），由此可以将该质粒切成两条不同的DNA片段，采用E1和S1酶切（只有M一个切点），得到一种DNA分子片段。

Answer 3

hellolele0已经回答的很好了。