Question

生物实验：血红蛋白的提取和分离

Answer 1

蛋白质的提取和分离一般分为四步：

(1)样品处理：包括洗涤红细胞;血红蛋白稀释;离心等操作收集到的血红蛋白溶液。

(2)粗分离：透析除去分子较小的杂质。

(3)纯化：通过凝胶色谱法将分子量较大的杂质蛋白质除去。

(4)纯度鉴定：通过聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。

(一)样品处理

1、红细胞的洗涤：

目的是去除杂蛋白。要加入柠檬酸钠防止血液凝固;离心将血液分层，用胶头吸管吸出黄色血浆;用生理盐水洗涤。

2、血红蛋白的释放：

在蒸馏水和甲苯作用下，红细胞破裂释放

3、分离血红蛋白溶液：

离心分层;滤纸过滤去除脂溶性沉淀层;分液漏斗分出红色透明液体。

4、透析：

装入透析袋并置于磷酸缓冲液中(PH为7.0)透析。