需要的冻存细胞,可以直接放进液氮吗
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细胞的冻存和复苏一般是遵守“慢冻快融”.常规的慢冻方法是:
1.先将冻存管放入4℃冰箱,约40min.
2.接着置于-20℃冰箱,约30~60min.
3.置于-80℃超低温冰箱中放置过夜.
4.置于液氮罐中长期保存.
1.先将冻存管放入4℃冰箱,约40min.
2.接着置于-20℃冰箱,约30~60min.
3.置于-80℃超低温冰箱中放置过夜.
4.置于液氮罐中长期保存.
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不可以!
为了成功冻存细胞,“慢冻”是必要的步骤,直接放入液氮中会损伤细胞。以下是一种常见的细胞慢冻方法:
1. 配制冻存液:通常由10% DMSO和90%胎牛血清组成,预先保存在4°C的冰箱中。
2. 处理细胞:用胰酶消化细胞,用PBS冲洗后操作尽可能轻柔。
3. 混匀冻存液:将预冷的冻存液加入离心后的细胞中,轻轻混匀以保护细胞免受损伤和减少冰晶形成。
4. 冷冻保存:将细胞放置在-80°C的冰箱中过夜。
5. 液氮储存:最后转移到液氮罐中进行长期储存。
这些步骤能帮助最大程度地保持细胞的完整性和生存率,确保成功冻存细胞。
为了成功冻存细胞,“慢冻”是必要的步骤,直接放入液氮中会损伤细胞。以下是一种常见的细胞慢冻方法:
1. 配制冻存液:通常由10% DMSO和90%胎牛血清组成,预先保存在4°C的冰箱中。
2. 处理细胞:用胰酶消化细胞,用PBS冲洗后操作尽可能轻柔。
3. 混匀冻存液:将预冷的冻存液加入离心后的细胞中,轻轻混匀以保护细胞免受损伤和减少冰晶形成。
4. 冷冻保存:将细胞放置在-80°C的冰箱中过夜。
5. 液氮储存:最后转移到液氮罐中进行长期储存。
这些步骤能帮助最大程度地保持细胞的完整性和生存率,确保成功冻存细胞。
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