Question

如何通过形状区别蛋白晶体和盐晶

Answer 1

1、在已知蛋白质晶体、盐晶或沉淀剂晶体形貌、颜色情况下，可用普通光学或偏光显微镜直接观察鉴别。有经验的晶体学家可以从形貌来判断对应晶体的对称性，并据此判断它是盐晶体还是蛋白质晶体。
　　2、在未知情况下可采用如下方法：
　　①脱水法：用晶体环固定晶体，较长时间暴露在空气中，蛋白质晶体由于脱水而损毁，盐晶则不发生变化；
　　②密度法：捞出晶体，轻放在结晶液滴上，蛋白质晶体能短时间浮于表面，而盐晶快速下沉；
　　③硬度法：在低倍光学显微镜下，在结晶液中用针尖触碰晶体，蛋白质晶体偏软，容易碎成粉状，而盐晶偏硬，容易碎裂成块；
　　④溶解法：用湿滤纸触碰晶体，蛋白质晶体很快溶解，而盐晶需较长时间才能溶解；
　　⑤灼烧法：捞出晶体放在盖玻片上，火焰灼烧盖玻片底部，显微镜下观察蛋白质晶体会由半透明状变成纯黑色粉末，也有毛发特有的烧焦味；
　　⑥sds-page法：捞出晶体，在沉淀剂中轻蘸洗涤，经电泳后判断是否有目标染色条带；⑦对照法：参照盐的溶解度和扩散平衡时结晶液中的盐浓度，判断能否长出盐晶，也可单独培养盐晶，根据形貌作对照鉴别等；
　　⑧偏光法：蛋白质晶体和盐晶都有较强的偏光性，利用此性质能区别晶体和其他非晶态物质（如玻璃壁上和结晶液内的小气泡、无定形沉淀等），效果显著；
　　⑨衍射法：即x线单晶衍射法，获得衍射图谱，解析结构，进而判定是否是蛋白质晶体。