Question

Sanger法测序的原理是什么？

Answer 1

Sanger法测序
的原理就是利用一种baiDNA
聚合酶
来延伸结合在待定序列模板上的
引物
。直到掺入一种
链终止
核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种
脱氧核苷酸
三磷du酸(dNTP)，并混入限量的一种不同的
双脱氧
核苷三磷酸
(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基因，使延长zhi的
寡聚核苷酸
选择性地在G、A、T或C处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dNTPs和ddNTPs的相对浓度可以调整，使反dao应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。它们具有共同的起始点，但终止在不同的核苷酸上，可通过专高分辨率
变性凝胶
属
电泳分离
大小不同的片段，凝胶处理后可用X-光胶片
放射自显影
或非
同位素标记
进行检测。