Question

为什么说土壤是人类最丰富的菌种资源库?如何从中筛选出所需的菌种?

Answer 1

土壤是微生物生长和栖息的良好基地。土壤具有绝大多数微生物生活所需的各种条件，是自然界微生物生长繁殖的良好基地。其原因在于土壤含有丰富的动植物和微生物残体，可供微生物作为碳源、氮源和能源。土壤含有大量而全面的矿质元素，供微生物生命活动所需。土壤中的水分都可满足微生物对水分的需求。不论通气条件如何，都可适宜某些微生物类群的生长。通气条件好可为好氧性微生物创造生活条件；通气条件差，处于厌氧状态时又成了厌氧性微生物发育的理想环境。土壤中的通气状况变化时，生活其间的微生物各类群之间的相对数量也起变化。土壤的 pH 值范围在 3.5–10.0 之 间，多数在 5.5–8.5 之间。而大多数微生物的适宜生长 pH 也在这一范围。即使在较酸或较碱性的土壤中，也有较耐酸、喜酸或较耐碱、喜碱的微生物发育繁殖，各得其所地生活着。土壤温度变化幅度小而缓慢，这一特性极为有利于微生物的生长。如土壤温度夏季比空气温度低，而冬季又比空气温度高。土壤的温度范围恰是中温性和低温性微生物生长的适宜范围。
因此，土壤是微生物资源的巨大宝库。
实验步骤：
一、PDA培养基的配制
1、原料准备：
1000ml水：200g土豆：20g蔗糖：15—20g琼脂

二、牛肉膏蛋白胨培养基的配制
1、原料准备：
1000ml水：3g牛肉膏：10g蛋白胨：5gNaCl：15—20g 琼脂

三、倒平皿
1、培养基、培养皿、涂抹棒、枪头、无菌水等置于高温灭菌锅121摄氏度灭菌25min；超净工作台紫外线消毒20min。
2、将培养基、培养皿、涂抹棒、枪头、无菌水等移入超净工作台中。
3、将培养基倒入培养皿（培养皿三分之一容积），在酒精灯火焰附近（火焰周围10厘米左右）操作。
4、开盖至冷却，盖上盖子。
四、土壤溶液的配置与涂布
实验原料：
土壤样本10g、90ml 无菌水（锥形瓶中）、9ml 无菌水(试管)、培养皿
实验步骤：
1、电子天平准确称取10.00 g 土样，加入90ml 无菌水中，振荡摇匀，酒精擦拭后移入超净工作台。
2、将试管依次编号1-6，用移液枪移取1000微升悬浊液置于1 号试管，再移取1000微升 1号试管悬浊液置于2号试管，依次做六个试管。
3、涂布
①、用移液枪分别取4、5、6号试管溶液各200微升（每个试管取2—4份）置于培养基中并做好标记（土壤采集地、操作人、溶液浓度级）。
②、用涂抹棒均匀涂抹培养基中的土壤溶液。
（以上均在超净工作台酒精灯火焰附近操作，确保无菌环境）
4、在恒温干燥箱中培养，观察。
五、菌种的分离纯化
1、超净工作台紫外线消毒20min。
2、将要分离菌株的培养基及倒好平板的培养基，接种环，酒精灯转移至超净工作台中。
3、点燃酒精灯，在酒精灯火焰旁操作。
4、将接种环在火焰上灼烧至红，在火焰旁冷却后接取菌种。
5、将菌种用划线法或点种法接于培养基中。
6、取出，移至恒温培养箱中培养。
7、定期观察菌种生长情况。

Answer 2

到化验室里就可以完成的。