磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取过程

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磁珠法核酸提取过程:

1、裂解

取抗凝全血到1.5mLEP管中,加入BufferA、BufferB,混合均匀。然后把EP管置于恒温水箱中温育15~20min。


2、结合 
    将EP管从温育设备中取出,离心后取上清,加入振荡混匀的磁珠结合液,颠倒混匀。将EP管置于磁力架上进行磁分离,弃废液(吸净管盖及管底残液)。


3、洗涤 
⑴ 加入洗涤液Ⅰ,点振数次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;
⑵ 加入洗涤液Ⅱ,点振数次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;
⑶ 重复步骤⑵一次;
⑷ 室温下开盖干燥。


4、洗脱 
加入洗脱液,放置水浴锅中温育后磁分离,小心吸取上清液至新的EP管中,进行下游实验。

百度网友3068193
2020-04-02 · TA获得超过117个赞
知道答主
回答量:142
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取10-20mg左右的组织,用液氮研磨为粉末,转入1.5mL 离心管内,加入100 μL 生理盐水,振荡15秒 (或直接在100 μL 生理盐水中将组织匀浆为细胞悬液),加入200 μL 裂解液, 20 μL biog复合消化液,充分混匀,56℃温育12分钟(如组织匀浆不充分,可适当延长消化时间至组织完全消化)。

冷却到室温,加入300μL异丙醇,充分混匀,再加入20μL磁珠复合液(每次使用前须充分混匀),振荡混匀3min(注意不要颠倒混匀,以防磁珠粘附于管盖内壁),静置2min。

将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附,开盖,彻底吸弃上清液(注意枪头不要接触磁珠)。

加入800μL配制后的洗涤液,将离心管从磁力架上取下,充分振荡2min,确保磁珠完全分散。将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附,开盖,彻底吸弃上清液(注意枪头不要接触磁珠)。

将离心管从磁力架上取下,开盖,干燥约3-5min,至无明显乙醇气味。

加入50-100 μL洗脱液,振荡至磁珠充分散开,室温静置2min,再振荡混匀1min。

将离心管置于磁力架上,待磁珠完全吸附后,小心吸取上清液至一新的1.5mL离心管中,提取的核酸可直接用于下游实验,或-20℃保存备用。
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匿名用户
2020-05-21
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BIOG磁珠法核酸提取试剂盒可用于血液、组织匀浆液、细胞悬液、拭子涮洗液、血浆、血清、乳液、腹水、尿液等样本中DNA或RNA的提取纯化, 可手工采用磁力架操作,也可配套自动化提取仪使用。操作简便快速,只需20多分钟即可完成全部提取操作。
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一七九iKsI
2016-06-01 · TA获得超过108个赞
知道答主
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磁珠法核酸提取一般可以分为四步:裂解——结合——洗涤——洗脱。

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