Question

质粒dna电泳有何特点,为什么

Answer 1

质粒dna电泳特点：这时电泳迁移速率又由慢变快，浓度较稀的胶线性范围较宽：超螺旋最快。因为：正常质粒是闭合的双链DNA。在电泳过程中可能使质粒发生开环，或者由开环解开螺旋变成线形。这三种形态电泳时的分离率不同，分离速度不同，分成三带。

闭环，开环，线形的螺旋率依次降低，（开环质粒是指双链环状的质粒DNA有部分解链，因此电泳速度最慢）三种构像源敬的质粒在琼脂糖电泳的前后顺序是超螺旋>线形>开环，线形的质粒在中间，而开环的质粒在最后。判断质粒质粒好坏的一个指标就是超螺旋质粒在所以质粒中的含量。

连续梯度的实验方法

1、 测量DNA溶液的体积，按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。

2、 每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液（10mg/ml溶于水）；立即将溴化乙锭溶液（漂浮在表层）与DNA－氯化铯溶液混匀， 溶液的终密度应为1.55g/ml（溶液的折射率为1.3860）溴化乙锭浓度大约740μg/ml。溴化乙锭贮存液猛厅应贮存于枝裂隐避光容器内（如用锡箔完全包裹的瓶子），于室温保存。