Question

dna聚合酶作用

Answer 1

DNA聚合酶的作用包括聚合、校对、切除和修复。

1、特性

（1）需要DNA模板，因此这类酶又称为依赖DNA的DNA聚合酶；

（2）需要RNA或DNA作为引物(primer)，即DNA聚合酶不能从头催化；

（3）催化dNTP加到引物的3'-OH末端，其速率为1000nt/min，因而DNA合成的方向是5’到3'；

（4）三种DNA聚合酶都属于多功能酶，它们在DNA复制和修复过程的不同阶段发挥作用。

2、DNA聚合酶与复制的保真性

DNA复制的保真性是遗传信息稳定传代的保证。生物体至少有3种机制实现保真性：

①遵守严格的碱基配对规律；

②5'—3’聚合酶活性中心对底物的选择，降低核苷酸的错配率； 

③3'—5’外切酶活性中心在复制出错时的即时校对。

应用：

E.coli的DNA pol Ⅰ涉及DNA损伤修复，在半保留复制中起辅助的作用。DNA polⅡ在修复损伤中也具有重要的作用。DNA polⅢ是一种多亚基的蛋白质，在DNA新链的从头合成中起复制酶的作用。

复制的忠实性问题会影响到翻译的精确性，这种忠实性主要依赖于碱基的特异性配对。DNA多聚酶能增加互补碱基的特异性，该特异性主要表现在以下两方面： 

①能够检查进入的碱基是否和模板互补，这时通过一个匹配的化学特点加以识别，这是合成前的一种预防措施，称为合成前( presynthetic)错误控制； 

②在新的碱基加到链上以后，检查碱基是否配对。若发生错配，将会把刚加上去的错误碱基切除掉，这是校正控制( proofreading)。

不同DNA多聚酶聚合和校正之间的关系是不同的。有时，这些活性是由相同的蛋白质亚基产生的，但有时它们又还有不同的亚基。一个错误碱基的排除实际上是十分复杂的，因为这种切除反应是由不同位点催化的。