甲醛滴定法测定氨基氮
甲醛滴定法测定氨基氮如下:
一、目的 初步掌握甲醛滴定法测定 氨基酸 含量的原理和操作要点。
二、原理 水溶液中的氨基酸为两性离子,因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基。 用甲醛处理氨基酸,甲醛与氨基结合,可形成—NH—CH 2 0H,—N (CH 2 -0H) 2 等羟甲基衍生物,使NH 3+ 放出的H + 游离出来,这样就可用碱滴定放出的H + ,测定氨基氮,从而计算出氨基酸的含量。
若样品中只含某一种已知氨基酸,由甲醛滴定的结果可算出氨基酸的量。 若样品是多种氨基酸的混合物〈如蛋白水解液〉,则滴定结果不能作氨基酸滴定量的依据。
三、器材
1、锥形瓶
2、25 ml碱式滴定管
3、移液管
四、 试剂
1.0.5%酚酞酒精溶液
0.5g酚酞溶于100mL60%乙醇中
2.0.05%溴麝香草酚蓝溶液
0.05g溴麝香草酚蓝溶于100mL20%乙醇溶液中
3.1%甘氨酸溶液
1g甘氨酸溶于100rnl 蒸馏 水
4.标准0.100mol/LNaOH溶液,可采用0.100mol/L标准HCl溶液标
5.中性甲醛溶液
50ml甲醛溶液,加约3ml0.5%酚酞指示剂,滴加o.1mol/LNaOH溶液,使溶液成微粉红色,临用前配制。
五、操作
取3只锥形瓶,编以1、2、3号。于1、2号瓶中各加甘氨酸溶液2.0ml及水5.0ml;
于3号瓶中加水7.0ml。然后3只锥形瓶中各加入甲醛溶液5.0ml,0.05%溴麝香草酚蓝溶
液两滴及0.5%酚酞酒精溶液4滴。再用标准0.1mol/LNaOH溶液,滴定至紫色(pH0.7-9.0)。则每ml 氨基酸 溶液中含氨基氮的mg数为:
注:A——滴定样品消耗NaOH溶液的ml数
B——滴定空白消耗NaOH溶液的ml数
1.4008——1ml0.1mol/LNaOH溶液相当的氮mg
2024-11-24 广告