植物组织培养加入的营养物质和激素分别有哪些?
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植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含 有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素。植物组织培养需要加入蔗糖、大量元素、微量元素、植物生长激素等;动物细胞培养液的成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。动物细胞培养成功的关键在于培养液中是否含有动物血清,因为由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境,此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶,可以促进细胞的发育。 ②动物细胞培养液的特点:液体培养基、含动物血清。 ③动物细胞培养的条件:无菌、无毒的环境;营养物质(合成培养基);温度和pH(36.5±0.5℃,7.2~7.4);气体环境(氧气和二氧化碳)等。 一般大肠杆菌都使用LB 培养基,
其成分如下: 胰化蛋白胨、 酵母提取物、 NaCl 、如果是固体的培养基,就需要再加入琼脂粉
其成分如下: 胰化蛋白胨、 酵母提取物、 NaCl 、如果是固体的培养基,就需要再加入琼脂粉
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组织培养的基础培养基有MT、MS、SH、White等。基本培养基包括无机盐类的大量元素及微量元素和有机物质,碳源大多用蔗糖,有机养料包括水解酪蛋白、氨基酸、酵母提取液、椰乳等,维生素对生长也有促进作用。White培养基也经常用。Ms培养基是有较高的NO3一、K+和NH4+浓度,目前应用较广。
在组织培养中,愈伤组织和胚状体能否形成是培育出新植株的关键。在基础培养基里添加一定浓度的外源激素,可以诱导出愈伤组织、胚状体、不定芽、根等器官,最终可获得再生植株或次生物质。常用的激素类型有生长素类、细胞分裂素类、赤霉素类等。
一般认为,诱导愈伤组织的成败关键不在于植物材料的来源,而在于培养条件。植物组织培养中,影响培养力的因素是多方面的,而植物激素是愈伤组织诱导和绿苗分化的关键因素。诱导愈伤组织的生长素最常用的是IAA、NAA和2, 4-D,大多数材料选用2, 4-D,它对愈伤组织的诱导作用优于其它生长素,缺乏2, 4-D是导致直接出芽的原因。最常用的细胞分裂素是KT和6-BA。KT 的主要作用是促进细胞分裂,在分化培养基中,通常是添加KT、6-BA来促进愈伤组织分化。KT对愈伤组织诱导率不大,但在诱导培养基中添加KT 可以改善愈伤组织的质量,在一定程度上能延缓愈伤组织的衰老,延缓其器官分化能力的丧失,从而提高植株再生频率。
在组织培养中,愈伤组织和胚状体能否形成是培育出新植株的关键。在基础培养基里添加一定浓度的外源激素,可以诱导出愈伤组织、胚状体、不定芽、根等器官,最终可获得再生植株或次生物质。常用的激素类型有生长素类、细胞分裂素类、赤霉素类等。
一般认为,诱导愈伤组织的成败关键不在于植物材料的来源,而在于培养条件。植物组织培养中,影响培养力的因素是多方面的,而植物激素是愈伤组织诱导和绿苗分化的关键因素。诱导愈伤组织的生长素最常用的是IAA、NAA和2, 4-D,大多数材料选用2, 4-D,它对愈伤组织的诱导作用优于其它生长素,缺乏2, 4-D是导致直接出芽的原因。最常用的细胞分裂素是KT和6-BA。KT 的主要作用是促进细胞分裂,在分化培养基中,通常是添加KT、6-BA来促进愈伤组织分化。KT对愈伤组织诱导率不大,但在诱导培养基中添加KT 可以改善愈伤组织的质量,在一定程度上能延缓愈伤组织的衰老,延缓其器官分化能力的丧失,从而提高植株再生频率。
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营养物质主要有无机元素和有机物质两大类,无机元素依据含量多少大致分为大量元素和微量元素两大部分,其中大量元素有NH4NO3、KNO3、CaCl2.2H2O、CaCl2、MgSO4.7H2O、KH2PO4、(NH4)2SO4、Ca(NO3)2.4H2O、Na2SO4、NaH2PO4.2H2O、KCl,微量元素有KI、H3BO3、MnSO4.4H2O、MnSO4.H2O、ZnSO4.7H2O、Zn.Na2.EDTA、NaMoO4.2H2O、MoO3、CuSO4.5H2O、CoCl26H2O,铁盐(Fe2(SO4)3、FeSO4.7H2O、Na2.EDTA.2H2O、NaFe.EDTA)等,有机物质包括蔗糖、肌 醇、烟 酸、吡哆醇、硫胺素、甘氨酸、叶 酸、生物素等。依据培养基种类的不同,成分组成和含量均有不同。
激素有生长素(2,4-D,IAA,NAA,IBA,NOA等)、细胞分裂素(BA、2ip、ZT、KT等),以及不常用的赤霉素、脱落酸和乙烯。
激素有生长素(2,4-D,IAA,NAA,IBA,NOA等)、细胞分裂素(BA、2ip、ZT、KT等),以及不常用的赤霉素、脱落酸和乙烯。
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