Question

噬菌体侵染细菌试验中，短时间保温，搅拌，离心

1.保温的作用是什么？请详细说明
2.为什么保温时间不能过长？
3.搅拌和离心的作用是什么？
4.搅拌和离心的作用有什么区别？

Answer 1

保温的作用是为噬菌体和细菌提供一个适宜的生存环境，让其都能正常的生长繁殖下去，让噬菌体的遗传物质能顺利地进入细菌体内，利用细菌体内的蛋白质（没标记没有放射性）合成新的蛋白质外壳，保温时间过长会加入“子代噬菌体是噬菌体本身繁殖产生的，它既要本身核糖核酸的复制，也要本身蛋白质外壳（被标记有放射性）的复制”的概念，这样的子代噬菌体蛋白质外壳是有放射性的，而本实验是为了证明遗传物质主要为核糖核酸，核糖核酸能控制合成蛋白质外壳，而不是蛋白质的自我复制，所以子代噬菌体应该要在细菌体内繁殖产生而不是噬菌体的蛋白质外壳自我复制，所以要赶在细菌破裂之前结束保温，即保温时间不宜过长。搅拌和离心都是为了提取核糖核酸，只不过搅拌是为了让蛋白质外壳充分破裂，离心是为了让核糖核酸聚集并和蛋白质外壳分层，好检测不同成分的放射性。

Answer 2

保温是为了噬菌体完成吸附和侵入
如果保温时间过长，噬菌体可能继续后面的生物合成、裂解与释放，一般是10min。
搅拌是为了让吸附在菌体外的噬菌体外壳分散在培养液中。
之后才进行离心沉淀，离心的目前第就是为了使大肠杆菌沉淀，结果标记证明p32大部分出现在沉淀中，S35大部分在上清液中。证明了噬菌体的遗产物质是核酸而不是蛋白质。

Answer 3

如果只是搅拌而不离心，的确也能分开，但是需要的时间长，细菌会裂解。不知道你有没有注意到教科书上的原话，这个实验一定要在“短时间”保温后搅拌、离心让噬菌体和细菌分开。
搅拌和离心的目的是为了将噬菌体蛋白质外壳同侵入大肠杆菌的噬菌体dna分开，以便对放射性元素跟踪测试。离心会使质量较轻的噬菌体颗粒进入上清液，而被感染的细菌则形成沉淀，但这必须保证是在菌体裂解之前进行。噬菌体侵染细菌的速度很快，在37度的条件下大约40分钟就可以产生100到300个子代噬菌体。从感染到释放前的这段时间叫潜伏期，大约经历20到30分钟。短时间的保温可获得足够数量的子代噬菌体，但又必须避免超出潜伏期（确保溶液分层），所以离心要在“短时间”保温后及时进行。

Answer 4

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