Question

形成重组DNA分子的过程中，必须用同一种限制酶切割目地基因和载体

为什么要同一种限制酶啊???谢谢！！！

Answer 1

其实用同一种限制酶（单酶切）分别切割目的基因与运载体是最简单的一种方法，因为切割后能产生相同的粘性末端，末端之间能发生碱基互补配对而形成重组DNA分子，操作简单，但连接后会出现两种不需要的连接方式：目的基因——目的基因（环状）、质粒——质粒（环状），这样就加大了筛选工作量。所以也可用两种不同限制酶（双酶切）分别同时切割含目的基因的DNA片段和质粒，可以防止目的基因与质粒自身连接体的发生，克服单酶切的缺点，但由于每种限制酶作用的条件不同，一般不能两种酶不能同时使用，而是用完一种就要更换作用的外界条件，以保证酶的高效性。因此双酶切操作较复杂。

Answer 2

因为一种限制酶只能识别一种黏性末端，用同一种限制酶可以保证切割之后黏性末端是一样的！这样的话，就可以用连接酶链接在一起!如果不是的话，黏性末端不一样，那么，就无法链接了。

Answer 3

只有用同一种限制性内切酶才能切除相同的粘性末端，才能在重组时将目的基因与云载体成功粘合

Answer 4

因为运载体与目的基因之间的连接靠DNA连接酶，但识别靠的是碱基互补配对原则，同种的酶切才能保证位点之间能够正确识别结合

Answer 5

理论上是应该如此。但是我好想看到哪一年的高考题，用到了两种不同的限制酶切割，最后还是产生了互补的粘性末端。