Question

菌落PCR的具体操作方法

Answer 1

1。 挑取菌斑。2mL小量培养过夜。
2。 培养后取1微升菌液作为PCR模板，配制PCR体系。只是要做质粒插入片段鉴定的话，循环数20个就足够了。想用PCR再大量扩增片段的话，那要28个循环就好。
3。 电泳检测。
4。找到阳性克隆，剩余的菌液可以做质粒小量抽提或保种。

如果只是基于鉴定的目的，直接拿牙签或枪头挑点菌斑在PCR体系里面蘸下就可以做PCR了。