做ELISA的关键步骤是什么？
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ELISA关键是订一个可靠的试剂盒。
如果盒子已经订了，剩下的就是自己操作了。
一个，尽量用八道或者十二道移液器加样。对于相同的试剂，经如二抗，酶，显色液，终止液等。
另一个，自己的样品，因为每一孔的样品不一样，用排枪加有些麻烦，如果一次的样品比较少，而自己加样又比较快，可以一个孔一个孔的加，但如果想一次把96或者48T的做完，可以先摆好一些PCR管或者准备一个96孔细胞培养板。将自己的样品先加到PCR管或者培养板中（此板间距与酶板板相同）。记得加一定的余量，如一次加样是50ul，可以先加70ul。加完后再用排枪加样，这样可以缩短加样时间，减小每个孔间的时间误差。
另一个，如果有多余的孔，标准品孔可以做复孔，在自己的样品前加一次标准品，加完样品后再加一次标准品。
如果孔不够，那么可以将标准品放在样品中间加（比如先加四十个孔，加完标准品再加五十孔）
如果盒子已经订了，剩下的就是自己操作了。
一个，尽量用八道或者十二道移液器加样。对于相同的试剂，经如二抗，酶，显色液，终止液等。
另一个，自己的样品，因为每一孔的样品不一样，用排枪加有些麻烦，如果一次的样品比较少，而自己加样又比较快，可以一个孔一个孔的加，但如果想一次把96或者48T的做完，可以先摆好一些PCR管或者准备一个96孔细胞培养板。将自己的样品先加到PCR管或者培养板中（此板间距与酶板板相同）。记得加一定的余量，如一次加样是50ul，可以先加70ul。加完后再用排枪加样，这样可以缩短加样时间，减小每个孔间的时间误差。
另一个，如果有多余的孔，标准品孔可以做复孔，在自己的样品前加一次标准品，加完样品后再加一次标准品。
如果孔不够，那么可以将标准品放在样品中间加（比如先加四十个孔，加完标准品再加五十孔）
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