培养基的配制有哪些?
2019-06-21 · 农业农村部直属的大型综合出版社
1.培养基
培养基的种类较多,常常是不同种的植物要求的培养基成分不同。根据培养植物,选用适宜的培养基。现将常用的几种培养基组成介绍给读者,供参考。
(1)MS培养基
(1)MS培养基
(2)White培养基
(2)White培养基
(3)Vacin and Went(VW)培养基
(3)Vacin and Went(VW)培养基
(4)Kundson C(KC)培养基
(4)Kundson C(KC)培养基
2.培养基母液的配制和保存
经常配制培养基,为减少工作量及便于低温贮藏,一般配成比所需浓度高10~100倍的母液,配制培养基时只要按比例量取即可。配好的母液需装在棕色小口瓶中,存放在0~4℃冰箱中可使用半年至1年。如发现有沉淀物则不可再用,需重新配制。MS培养基母液配制如下:
3.培养基的配制过程
将母液从冰箱中取出,依次排好,按需要定量吸取,放入量筒中。称取琼脂,加少量水后加热,并不断搅拌,直到全部溶化。再加入称好的糖和前面备好的各种成分,不断搅拌,使之充分混合。测定已配好的培养基氢离子浓度(酸碱度),用0.1~1.0摩尔/升(0.1~1.0摩)氢氧化钠和盐酸将培养基调至所需的浓度。
将配好的培养基分别灌注到培养瓶中(试管或三角瓶),用盖子(棉塞、橡胶塞、铝箔)将瓶盖好,外面再包一层牛皮纸,标明编号。
培养基通常用高压灭菌锅灭菌。气压111.46~121.59千帕(1.1~1.2千克/厘米2压力),10~20分钟。冷却备用。
2023-07-19 广告
用灵敏度为0.1mg的天平称取药品.
(2)
往烧杯加入适量蒸馏水或无菌水.
(3)
将药品放入烧杯内,并用玻璃棒搅拌使其溶解,难溶时可适当加温以加速溶解.
(4)
要待一种药品完全溶解后再加入下一种药品.
(5)
所加入的药品应依次加入,直至药品全部加入溶解为止。
例
ms母液的配制
按ms培养基成分表,将各种化学物质归成几大类,分别为大量元素、微量元素、铁盐、有机物。
大量元素10倍液(mg/l)
微量元素1000倍液(mg/l)
有机物100倍液(mg/l)
铁盐
nh4no3
1,6500
kno3
1,9000
cacl2?2h2o
4,400
mgso4?7h2o
3,700
kh2po4
1,700
hbo3
6,200
mnso4?4h2o
22,300
znso4?7h2o
8,600
ki
830
na2moo4?2h2o
250
cuso4?5h2o
25
cocl2?6h2o
25
甘氨酸
200
肌醇
10,000
烟酸
50
维生素b6
50
维生素b1
40
5.57g
fes04?7h2o和7.45g
na2一edta溶于1升蒸馏水里,用时每配1升ms培养基取5ml。
取烧杯注入约600ml蒸馏水,按顺序加入药品并使其溶解,最后加蒸馏水定容至1000ml。
取烧杯注入约600ml蒸馏水,按顺序加入药品并使其溶解,最后加蒸馏水定容至1000ml。
2.
培养基制备
配制流程见图1-2,其顺序是:
①
取烧杯或三角瓶注入一定量的蒸馏水,将各种母液按所需容积分别用移液管吸取并混合在一起,然后按要求加入一定量的激素、蔗糖后定容至一定体积。
②
用1mol/l的naoh或hcl调节ph
③
如制固体培养基,则加入1%左右的琼脂后加热煮沸,使其熔化。
④
分装,可用漏斗将液状培养基注入培养瓶,注入量视培养瓶容量大小而定,通常为容器的1/5左右。
⑤
封瓶口。
⑥
高压蒸汽灭菌。120℃,1.5mpa,消毒15~20min。注意压力不能太大,时间也不宜过长,否则蔗糖、有机物特别是维生素类物质会在高温下分解,影响培养基的酸碱度,琼脂也会分解,颜色变深且不易凝固。
⑦
灭菌后的培养基可放入接种室内静置,让其降温后凝固,如需斜面可将其斜放。
广告 您可能关注的内容 |