Question

PCR目的条带弱且弥散无拖尾，菌液PCR结果同前，怎么回事？？？？？

我想问一下，我做PCR用的是CDNA，设计的是兼并引物，片段200bp吧，可是首次PCR时在目的位置出现模糊的弱的粗条带，目的位置条带处以上有拖尾，于是我切胶回收再以回收的做二次PCR，无拖尾且目的条带干净但很弱，于是我以回收的产物做菌，挑白斑摇，菌液PCR结果在目的条带处有何第一次PCR一样,弱而且弥散无拖尾，请教各位怎么回事？是我PCR体系问题么？谢谢哈

Answer 1

博凌科为-为你解答：第一种可能是胶有问题，如果跑其他样品条带没有弥散的情况的话，可能就是体系的问题，可以调整一下例如dNTP、酶等的量。