Question

一道与基因工程有关的选择题！！ 在线等！！

http://www.zujuan.com/quesDetail.aspx?subject=gzsw&quesid=40860
题目答案都有 求详细的解析！！

拜托啦~~

Answer 1

首先，要了解限制性内切酶能识别DNA分子上特定的序列和切点并进行切割，限制性内切酶具有专一性，即一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列。被限制内切酶切开的DNA两条单链切口，各含有几个伸出的、可互补配对的核苷酸，这种切口就是黏性末端。黏性末端之间，只要切口处伸出的核苷酸间存在互补，就能在DNA连接酶的作用下连接起来。
其次，高中生物书上一般强调为获得相同的粘性末端，质粒和目的基因用同种限制酶切割，但是，有些情况不然。比如上题。
再者，要了解的是目的基因要被切成两个粘性末端，也就是要切成两段才可以插入质粒中，看材料中限制酶I 识别序列和切点是—G↓GATCC— ，它只能把目的基因切成一段，而限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—，可以把目的基因切成两个粘性末端。故目的基因用限制酶II切割。
看质粒，限制酶I和限制酶II虽然识别的序列和切点不同，但形成的粘性末端是相同的，存在着互补关系，可以将目的基因和质粒连接起来，但是问题是，如果用限制酶II切质粒，那么将会把两个标记基因都会破坏掉，不能达到标记基因的作用；而用限制酶I切的话只能破坏标记基因GeneII，这样还保留一个标记基因用于检测和筛选。故质粒应该用限制酶I切割。
答案选D。

Answer 2

不知道你是高中还是大学，通俗的说（可能会有其他情况，根据题目解释，就不讨论了），目的基因连到质粒上，载体的酶切口应该与目的基因的两端粘末端互补配对。也就是A-T，G-C
－G GATC----------------- GATCC——
—CCTAG -----------------CTAG G——
短线表示目的基因 长线表示载体两端，这么看确实改选那个选项。
其实做重组用同一个限制性酶切也可以，早期也这么做过，只不过在这题里序列对不上。
注意限制性酶是切双链的 比如题中的酶1是这么切的：
-----GGATCC----- -----G GATCC-------
-----CCTAGG----- ------CCTAG G-------

Answer 3

好题
今年有不少学生被这道题难住了
首先 目的基因要用酶二 原因很简单 用酶一的话 只能切开一个切口 因为他的识别序列要长 所以GATC酶一识别不了 但是酶二可以识别酶一的序列 酶一是GGATCC 酶二只识别GATC
所以酶二可以识别酶一的序列 然而酶一不可以识别酶二的序列 所以要得到目的基因只能用酶二 或者酶一和酶二一起用
然后就是载体了 载体要是用酶二的话 就把俩抗性基因都切了 所以要用酶一 而且不能俩个一起用 不知道这位同学你明白了吗·？

Answer 4

首先，质粒只能用限制内切酶I 来切，如果用II 的话 ，就切成两段了；
第二基因需要用限制性内切酶II来切，否则切不下来。
限制性内切酶II可以切I和II的序列，而II只能切自己的特有序列，差别就在左端是否有G。
不明白的话，可以继续追问！