Question

高二生物！基因工程的！ 在线等！

是这样的。书上说将目的基因转入质粒的时候，要进行筛选。 此时质粒带有标记基因，那此时的检测方法是什么？ 那将这个质粒转入农杆菌中，在检测的方法是什么？ 将农杆菌转入植物细胞中，检测方法又是什么。。 三个检测，把我弄糊涂了。 请各位指点下

Answer 1

相应的标记基因的表答产物的检测，如是抗性基因，就用带有相应的培养基培养，看看农杆菌上带有什么标记基因，一般是四环素抗性基因。我是这样描述给我的学生的——检测目的基因是否导入受体细胞用标记基因检测；检测目的基因是否能在受体细胞中稳定存在用DNA分子杂交技术；能否表达分子水平上用分子杂交技术（转录用DNA-RNA分子杂交技术，翻译用抗原-抗体杂交技术）个体水平上用相应的接种试验如抗虫接种试验等

Answer 2

先说一下质粒带有标记基因的检测，可又有很多种方法，比如说DNA探针，利用转录的原理可以到的，因为他们都有特定的核苷酸结合的方法啊。这个我说的也不知道是否符合书上的说法，因为我也是很久以前学的，至于质粒转入农杆菌中的检测方法就要看农杆菌是否代谢了相应的代谢产物。农杆菌转入细胞中就看植物是否相应的症状。也大概就这样的，专业术语我忘了很多

Answer 3

可以在质粒上连上一段抗性基因，比如抗某些抗生素的基因。
连上抗性基因导入细菌以后在含相关抗生素的培养基中培养，不含抗性基因的细菌不能存活
转入植物细胞以后可以通过检测转入基因的表达状况如mRNA等检测是否转入细胞

Answer 4

还是eagle_diao 说得好~~~你按他的说法理解
~~~~我就不说了~~

Answer 5

理论上，前两步检测只需在含相应抗性培养基培养即可，转入细胞后，根据载体分析，比如带有Gus或者GFP标记的从外表就能看出来，否则可采用PCR的方法。