Question

将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图．请据图回答：（1）获得A有两条途径：一是以A的

将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图．请据图回答：（1）获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在______酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在______作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的______序列，推测出响应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的______序列，再通过化学方法合成所需基因．（2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有______、______、4种脱氧核糖核苷三磷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成．（3）由A和载体B拼接形成的C通常称为______．（4）在基因工程中，常用Ca2+处理D，其目的是______．

Answer 1

（1）利用逆转录法合成目的基因的过程是：以mRNA为模板，在逆转录酶的催化作用下合成单链DNA，然后在DNA聚合酶作用下，合成双链DNA分子；根据蛋白质工程合成目的基因的过程是：根据目标蛋白质的氨基酸序列，推测相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测DNA中脱氧核苷酸的排列顺序，通过化学方法合成．
（2）PCR过程中需要酶、底物、模板、引物和能量等条件．
（3）目的基因和运载体结合，形成基因表达载体．
（4）在利用大肠杆菌做受体细胞时，需要先用Ca²⁺处理，使之成为感受态细胞，有利于其吸收重组DNA分子．
故答案为：
（1）逆转录；  DNA聚合酶；   氨基酸；  脱氧核苷酸；
（2）引物；   模板（A基因）；
（3）基因表达载体；
（4）使其成为感受态细胞，有利于吸收重组DNA分子；