Question

室温中蒸馏水中的DNA变化如何?为什么? 请注明答案来源.

Answer 1

蒸馏水中的DNA在室温下就会变性.
每一个核苷酸的磷酸基上都带有一个负电荷.如果这些负电荷没有被中和,双链之间的这种强有力的静电排斥作用将驱使两条链分开(在同一条链内虽然也存在着这种静电斥力,但由于链内的共价键,这种静电斥力并不重要).但是当有盐类加入时,这些带负电荷的磷酸基团可以被正离子(如Na+)所中和,也就是正离子围绕在磷酸基周围形成了"离子云",有效地屏蔽了磷酸基之间的静电斥力.这就是Debye-Hvckel 离子屏蔽理论.在生理盐浓度(约0.2mol／L)时就发生了这种屏蔽作用．斥力也被中止.当离子浓度降低时,这种屏蔽作用减弱,斥力增大,因而Tm值随之降低.事实上．纯蒸馏水中的DNA在室温下就会变性,也就是这个缘故.在超过生理盐浓度时,Tm值仍然随着离子强度的增加而上升,这是因为在高盐浓度下碱基的溶解性降低而增加了疏水作用力,促进了双螺旋结构的稳定.
事实上,平时制备的DNA也总是DNA的钠盐,每个磷酸基总是结合一个Na+在用Nacl和CsCl测量DNA分子量时,就会得到不同的数值,二者之比为0.75.因为单核苷酸的平均分子量为330,若是钠盐则为353,若是铯盐则为467.353／467＝0.75.这就是一个有力的证据.
除了DNA需要组蛋白等条件维持稳定外,室温低于体温也是原因.