如何排除DNA溶液中,RNA和蛋白质的干扰?最好详细点

是紫外分光光度法测定DNA吸光度... 是 紫外分光光度法测定DNA吸光度 展开
Izeark
2011-05-22
知道答主
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苯酚可以使蛋白质变性,可以用于抽提纯化DNA,但苯酚的氧化产物可以使核酸链发生断裂。所使用的苯酚在使用前必须经过重蒸,且都必须用0.1mol/LTris-HCl (pH7.6)进行平衡。

再利用碱水解RNA而不水解DNA的特性,进行碱水解后分离即可。
追问
你的那个方法能排除RNA 在紫外分光光度法测DNA的干扰吗?
追答
基本上可以,我做实验用过碱水解法,最后的实验结果误差在允许范围之内。如果实在不放心可以用RNA酶处理,再用酚氯仿抽提使蛋白质和DNA脱离,在高盐存在下乙醇沉淀收集DNA,最后能得到较纯的DNA,排除RNA的干扰。
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648426545
2011-05-22 · TA获得超过355个赞
知道答主
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苯酚可以使蛋白质变性,可以用于抽提纯化DNA,但苯酚的氧化产物可以使核酸链发生断裂。所使用的苯酚在使用前必须经过重蒸,且都必须用0.1mol/LTris-HCl (pH7.6)进行平衡。
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949034434
2011-05-29
知道答主
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直接使用差速离心法
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