Question

下列哪一种方法不能用于检测目的基因是否成功导入或表达？

A。将目的基因直接进行放射性标记，导入受体细胞后用检测仪跟踪。
B。在含某种抗生素的培养基中培养导入了重组质粒的大肠杆菌。
C。利用相应的DNA探针与受体细胞DNA分子进行杂交。
D。提取受体细胞蛋白质，利用抗原-抗体特异性反应进行检测。

Answer 1

选A
A，这种方法是不行的，因为受体细胞多次分裂以后，子代细胞就会失去放射性（因为只有最初的DNA模板具有放射性，而DNA合成的原料不具有放射性），所以就无法判断了。
B，可以。只有成功导入和表达的，可以产生对抗生素的抗性，可以在此培养基上生存和形成菌落；否则，不能生存和形成菌落。
C，可以。如果有杂交区域出现，说明导入成功。
D，可以。如果产生抗原抗体反应，说明导入和表达成功。

追问

那A中如果在染色体上检测到放射性，那不是就说明导入了么？
B中又没说重组质粒上有抗性基因，好象不准确吧？

追答

染色体？一般，导入的目的基因都是不会整合到宿主DNA上的。
注意：导入之后还要能够保持在子代细胞中稳定存在才可以，有些质粒虽然初次可以导入，但是可能不能在宿主细胞中稳定存在和大量复制，宿主细胞多次分裂之后就丢失了。即使可以稳定存在，而多次繁殖以后，子代细胞也无法跟踪检测，因为新合成的子代目的基因的DNA分子不具有放射性，也就无法跟踪判断了。注意选项中的【跟踪】二字的含义。
B选项，用于基因工程的质粒，必须是含有抗性标记的，这是实验“潜规则”，不用特别说明。