请问：基因工程中用两种限制性内切酶切割如何避免出现质粒与质粒、目的基因与目的基因连接。请解释
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“两条目的基因的1处粘性末端不也可以链接吗？”，当然存在这种可能性。
但用两种限制性内切酶切割最主要的目的是防止载体切割后的自连，几率不但大，而且可以产生克隆，大量的自连会影响挑选重组的克隆。
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研载生物科技（上海）有限公司_
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用两种限制酶切割，把目的基因完全切割下来，以使之能产生目的基因-质粒新组合，但并不能防止出现目的基因的自连，所以要经过筛选，才能确保找出目的基因-质粒的符合目的的组合。
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不清楚你要问什么，按我的理解给你个参考答案吧 限制性内切酶识别基因中特定的核苷酸序列，对其进行切割，也就是说两种酶的话只能产生两种不同核苷酸序列的粘性末端，他们不可能自己连接，还有重组DNA是要在连接酶的情况下才能实现，如果在获取目的基因的过程不加入连接酶，基因是不可能自己发生重组的现象的，希望我的回答对你有一定的帮助
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