Question

博凌科为血液（液体样本）总RNA快速提取试剂盒（离心柱型）使用时需要注意什么？提取范围如何

Answer 1

博凌科为血液（液体样本）总RNA快速提取试剂盒（离心柱型）
改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA 酶，然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的RNase free water将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒特点:
◆ 快速--- 15-20分钟完成实验
◆ 高纯--- 独特的去蛋白液多次漂洗去蛋白,
独创基因组DNA漂洗液去除基因组污染
◆ 重复性好---进口特制吸附膜
◆ 方便--- 不需要分离红细胞和白细胞
不需要进行另外的红细胞裂解步骤。

注意事项:
◆ 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
◆ 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
◆ 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。裂解液RLS可以常温运输，收到后4℃避光保存。
◆ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

提取范围：
血液、血清、血浆、病毒培养液以及任何液体形式的样品中提取RNA。

产量：
每1ml液体样品或1mg组织或1×106培养细胞预期的RNA产量
1.人和动物全血，10～20μg
2.人淋巴细胞（约7×107白细胞），60～70μg
3.肝和脾，6～10μg
4.肾，3～4μg
5.骨骼肌和脑组织，1～1.5μg
6.胎盘，1～4μg
7.上皮细胞(1×106 cultured cells)，8～15μg
8.纤维母细胞(1×106 cultured cells)，5～7μg

小 知 识
血液总RNA提取是一个比较难的问题，因为血液本身90%多都是水，RNA含量少，所有提取RNA相对困难，现有市场上的大部分血液总RNA提取试剂盒都需要裂解红细胞，倒掉上清，然后再从白细胞中提取总RNA，最后还要用DNase酶进行基因组DNA的消化，整个操作时间超过一个半小时，即使有RNA提取出来，也都降解了。
百泰克创造性的推出了新一代的血液总RNA提取试剂盒，可以说是目前最简便、效率最高的血液总RNA提取试剂盒，他的特点如下：
◆ 无需分离红细胞，直接对血液进行裂解，既简化步骤，又避免白细胞的损失
◆ 无需用DNase酶进行基因组DNA的消化
◆ 步骤简单，只需要半小时
◆ 提取的总RNA可以直接做RT-PCR等下游实验