博凌科为TRIpure LS Reagent 血液(血液样本)RNA抽提试剂提取DNA时,血液样品如何保存?提取步骤是怎样的

幸福花开456
2011-05-30 · 超过14用户采纳过TA的回答
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博凌科为TRIpure LS Reagent 血液(血液样本)RNA抽提试剂
TRIpure LS Reagent试剂是直接从来源于人,动物、植物,酵母,细菌和病毒的液体样品中提取总RNA的试剂。在提取血液等液体样品的RNA时按一定体积比加入该试剂即可.省去了在处理样品前离心去除液体的步骤。
使用该试剂可以同时提取DNA及蛋白质。提取的RNA样品可以用于后继的RT-PCR、Northern blot、dot杂交及体外转录等实验。回收的DNA片段可以用于PCR反应。

血液样品的保存:
为了保证提取效果,请选择新鲜的血液进行RNA的提取。在收集到血液样品后,需要加入抗凝剂。抗凝剂的选择首选EDTA,其他抗凝剂如:柠檬酸盐、肝素或者ACD也可以使用。加入抗凝剂的血液样品最好在几个小时内进行RNA提取实验。不同种类的mRNA,其半衰期也不尽相同。调控基因的mRNA的半衰期比看家基因mRNA的半衰期要短。因此,为了保证所提取的RNA能够包含更全面的信息,请尽量避免使用保存时间过长的血液进行RNA的提取。

基本步骤:
◆ 按照3:1的体积比例加入TRIpure LS reagent和待提取的液体样品(固体样品用水调整体积比至3:1)振荡混匀。
◆ 加入氯仿帮助有机相和水相分层。
◆ 异丙醇沉淀RNA。
◆ 漂洗RNA沉淀。
◆ RNase-free H2O重新溶解RNA沉淀。

注:本产品不需要进行红细胞裂解的步骤,更快,纯度高。
产品特点:
◆ 方便--- 不需要分离红细胞和白细胞
不需要进行另外的红细胞裂解步骤。

保存条件:
2-8℃ 避光保存一年。

提取范围:
血液、血清、血浆、病毒培养液以及任何液体形式的样品中提取RNA。

产量:
每1ml液体样品或1mg组织或1×106培养细胞预期的RNA产量
1.人和动物全血,15~20μg
2.人淋巴细胞(约7×107白细胞),60~70μg
3.肝和脾,6~10μg
4.肾,3~4μg
5.骨骼肌和脑组织,1~1.5μg
6.胎盘,1~4μg
7.上皮细胞(1×106 cultured cells),8~15μg
8.纤维母细胞(1×106 cultured cells),5~7μg
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