Question

请问一下，什么是菌液pcr?

Answer 1

菌液pcr是指菌液的聚合酶链式反应，是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。

PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。

DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。

扩展资料

转化的农杆菌R1000，EHA105，LBA4404 用碱裂解法提取表达载体pBTU质粒，筛选到转化子，计算转化率约为10～10。单菌落的菌体用特异引物进行PCR反应后扩增出目的基因，进一步证实直接从菌中扩增目的基因片段的方法是可行的。

经紫外分光光度计检测扩增产物的浓度为0.1～0.5μg/μl。试验发现某些已转化的单菌落质粒拷贝数少导致提取质粒困难，经PCR扩增反应后有些单菌落扩增出具有目的基因的转化子，可见 PCR扩增反应可快速鉴定出用质料提取方法无法确定出的转化子，提高了鉴定水平和效率。

参考资料来源：百度百科-PCR

Answer 2

用菌液行PCR还有一个小窍门，省很多事，就是你在挑菌落进行培养时准备1.5ML的EP管，每个管中加入1ML培养基，用接种针挑取菌落接种于EP管中，摇菌几个小时，摇动EP管观察，如果发现有混浊即可用来PCR。我从一开始就用这一方法，非常 成功，省去了准备试管的时间，并且菌液存于有盖的EP管中，用来测序，冻存非常方便。 在用接种针接种时很多人担心接种不上，因此反复的挑菌落，其实大可不必，当接种针在来板上无菌落的地方冷确后，轻点菌落一下，然后在EP管中涮一下即可，肯定能接种上。
后来听我们老板说国外实验室在挑细菌克隆时也是用EP管摇菌的，尽管放心的用吧，会成功的。

Answer 3

用来快速鉴定细菌克隆，省掉质粒提取那一步，取少量细菌培养液通过加热破坏后直接做PCR。有时候时直接挑取克隆的一部分直接做PCR，连菌液培养数小时都省了。
如果你做TOPO TA 克隆，手册里面就有挑取克隆直接做PCR的方法。