SSR引物的扩增位点问题
有些文章说,一对SSR引物可能有多个位点,是什么意思?表现在聚丙烯凝胶电泳图谱上是怎么回事?在线等高手,谢谢。...
有些文章说,一对SSR引物可能有多个位点,是什么意思?表现在聚丙烯凝胶电泳图谱上是怎么回事?在线等高手,谢谢。
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SSR也称为微卫星DNA(MicrosatelliteDNA),是一类由几个核苷酸(一般为1~6个)为重复单位组成的长达几十个核苷酸的串联重复序列.由于每个SSR两侧的序列一般是相对保守的单拷贝序列,所以
SSR标记就将微卫星侧翼的DNA片段克隆、测序,然后根据微卫星的侧翼序列就可以人工合成引物进行PCR扩增,从而将单个微卫星位点扩增出来。由于单个微卫星位点重复单元在数量上的变异,个体的扩增产物在长度上的变化就产生长度的多态性。
而在一个基因组DNA中,某个微卫星DNA(SSR)有可能存在多个,所以也就会有多个位点,因为他克隆的是SSR本身,具体可能会出现两种情况,一个是它会扩增出两个SSR基因中间的片段,而产生除SSR外的其它条带,也有可能酶的活性不够,SSR基因之间距离过远,就只会产生SSR片段,和正常只有一个位点的情况一样。这个没有自己做过,是我自己根据一些知识推测出来的,希望对你有帮助。
SSR标记就将微卫星侧翼的DNA片段克隆、测序,然后根据微卫星的侧翼序列就可以人工合成引物进行PCR扩增,从而将单个微卫星位点扩增出来。由于单个微卫星位点重复单元在数量上的变异,个体的扩增产物在长度上的变化就产生长度的多态性。
而在一个基因组DNA中,某个微卫星DNA(SSR)有可能存在多个,所以也就会有多个位点,因为他克隆的是SSR本身,具体可能会出现两种情况,一个是它会扩增出两个SSR基因中间的片段,而产生除SSR外的其它条带,也有可能酶的活性不够,SSR基因之间距离过远,就只会产生SSR片段,和正常只有一个位点的情况一样。这个没有自己做过,是我自己根据一些知识推测出来的,希望对你有帮助。
追问
那您的意思是,一般情况下,SSR只有一个位点,如果出现多个位点,是不正常现象?
追答
应该要看那个模板里面你选用来设计位点的SSR到底有多少个了,如果很多的话,自然有多个位点,这个我也不是很确定是不是正常。
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