Question

高效液相基线呈锯齿状该怎么办？

大家好，我是高效液相的新手，遇到一些小麻烦，希望大家能帮忙解答

我用的流动相是75%的甲醇和0.1%的磷酸

最开始走流速0.2ml/min时候，基线平稳

后来流速变成1.0ml/min后，基线呈锯齿状

这是不是说明是泵的问题呢？ purge阀外接的接液接口出了点故障，purge时有部分液体是向外喷的状态，会不会是因为这个原因导致泵有问题呢？但是我的理解是，因为purge阀关掉后流动相不经过这个接口所以应该不会造成这个问题， 不知道我的理解是否正确

另外其他可能导致基线呈锯齿状的原因我也试过

1. 流动相里面有气泡。 因此我再次过滤和超声波除气，另外有在线除气机， 基线依然呈锯齿状

2. 色谱柱问题。 重新换了根柱子依然出现锯齿状

3. 检测器有气泡。 堵住检测器出液接口，虽然没能完全堵牢，基线有点变化，但是依然呈锯齿状

4. 关掉泵。 泵压为零，流速为零，基线一直往上漂移，但是没有了锯齿状

以上是不是可以判断是因为泵的问题呢，那该怎么解决呢

另外我想问一下，基线在什么范围内波动算是正常呢

上面有任何错误，请各位高人给予纠正，也希望各位高人能多多解答，在这里我万分感谢

Answer 1

1. 流动相里面有气泡。可以通过观察泵压是否稳定，一般波动很小，否则应赶气泡不仅是流动相的，有的气泡在泵头应用注射器抽头；
2. 色谱柱问题。 重新换了根柱子依然出现锯齿状，可排除柱子原因，可用二通不接色谱柱，用50%异丙醇冲洗包括检测器可能被污染，处理方法很多，你可搜索一下；
3.排除流动相原因可用纯甲醇冲洗观察，另外甲醇又是赶气泡的一个比较好的溶剂；
不在现场，只能简单判断，放心，不是大问题！若不行再慢慢排查，呵呵！

追问

谢谢您的回答·
我用纯甲醇也进行过冲洗，但是基线还是出现锯齿状。。。。
另外我很想问一下，二通不接色谱柱具体怎么弄啊，网上倒是有很多说这个，但是具体怎么弄却无从下手，望您指教，呵呵

追答

二通就是2cm左右的小管子，无填料，两端同色谱柱的两端，若没有二通可接一旧柱子，先用纯水或含甲醇10%的水冲2小时，再用甲醇冲1小时，再异丙醇0.5ml/min冲2小时，再用甲醇冲观察基线，基线若放大很多被会是锯齿状的，如何判断是否为正常噪音，简单方法是调以前正常图谱比较噪音，注意流动相中含盐噪音会相应增大。

追问

哇。。您真是太善良了
谢谢您这么详细的回答！

Answer 2

一般来说流动相至少要走十倍柱体积才可以进样，一般呈锯齿状要么是灯没开，要么是没出峰的时候Y轴是自动的所以单位比较小，这个不用管，只要流动相走平衡了，对照品有峰出来的时候Y轴自动根据峰高调整，基线就会看起来很平了，
泵没开的时候，那个基线...是检测器检测到的电磁信号吧

追问

真的很谢谢您的回答
不过我想问下灯没开是什么意思啊？
我的检测器是开着的啊

追答

选项里面能找到，有一个D灯，还有波长，灯没选中的话，检测器开着实际上是只开电源

追问

真是谢谢你啦~~