Question

大肠杆菌复制起始位点的确定方法

Answer 1

大肠杆菌的启动子必须和复制机器结合后才能启动复制，复制机器是蛋白质复合物。从实验角度来说，可以用染色质免疫沉淀技术（ChromatinImmunoprecipitation，简称ChIP)，其原理是在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起，通过超声或酶处理将染色质切为小片段后，利用抗原抗体的特异性识别反应，将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来。也就是说能够和目的蛋白相结合的DNA片段就是大肠杆菌的启动子序列。