Question

高中生物，关于酶

为验证pH对唾液淀粉酶活性的影响，某学生设计了下表中的实验方法步骤。在同学们提出的下列评价中，不合理的是
实验步骤 项目 试管1 试管2
1 加入可溶性淀粉溶液 2mL 2mL
2 加入新鲜唾淀粉酶溶液 1mL 1mL
3 加入1mol/L的盐酸溶液 ／ 1mL
加入1mol/L的NaOH溶液 1mL ／
4 置于37℃水浴中 5 mL 5 mL
5 滴入碘液 2滴 2滴
A、缺少pH为6.8的对照组
B、都置于37℃水浴中，可排除温度对酶活性的影响
C、检验实验结果的试剂选择不恰当
D、操作步骤设计合理

选 D
为什么不能用碘液？用斐林试剂吗？原理是什么？

Answer 1

这个实验用的就是碘液，如果用菲林试剂的话因为需要加热，可能会使酶失活，。
原理是淀粉遇碘变蓝，而淀粉酶会使淀粉水解。
这个之所以选D是因为，酶具有高效性，直接让酶和淀粉然后再调节PH，会使实验结果受到影响。

追问

……
题目的问题是：在同学们提出的下列评价中，不合理的是什么
既然选 D，那么 C、检验实验结果的试剂选择不恰当 这个选项是对的，不能用碘液！

追答

我的理解是：因为唾液淀粉酶的最适PH在中性左右，用同等浓度的等量酸碱，无法确定实验目的。所以错的不是用碘液，而是等浓度等量得酸碱。

追问

题目问题告诉了你不能用碘液……
你说步骤错了，那么在错的步骤下，淀粉与淀粉酶反应过程中并无其他因素干扰，你能找出什么试剂来检验结果？而且检验的现象不一样能说明“pH对唾液淀粉酶活性有影响”这个实验目的？

追答

不好意思，并没说不能用碘液。只说是试剂选择不当。
并且要按正确步骤考虑实验影响

追问

那用什么试剂检验？

追答

如果是有三组的话就可以是 中性 酸 碱
两组的话可以是 中性 酸 或者是 中性 碱
这样才能看出PH的影响，等浓度并且等量的强酸强碱对酶（中性酶）的影响差不多

Answer 2

按上述步骤进行，淀粉酶与淀粉完成了反应，后面再改变PH，对其活性有什么样的影响无法检测

追问

既然淀粉酶与淀粉完成了反应，那你觉得用什么样的试剂可以检验实验结果？
我觉得题目的意思是，在步骤正确的情况下，检验实验结果的试剂选择不恰当。
再说，我做过了几个类似的题目，步骤都没错，也不能用碘液，用的是斐林试剂！

追答

应该是先加试剂，后加淀粉酶
检测结果，有些资料谈到用碘液，好像碘液会与试剂有反应
而斐林试剂主要是检测有无反应产物还原糖的

追问

追问的内容与下面的那位一样……

追答

正确的步骤前三：①在1-5号试管中分别加入0.5%的淀粉液2mL
②加完淀粉液后,向各试管中加入相应的缓冲液3.00L,使各试管中反应液的pH依次稳定在5.00、6.20、6.80、7.40、8.00。
③分别向1-5号试管中加入0.5%唾液1mL,然后进行37℃恒温水浴。

追问

我知道正确的步骤是什么……
关键我的理解是，在正确步骤的前提下，试剂选用是错误的，那为什么错误？
如果你说我理解错了的话，那另当别论，可我在下面的追问中说的很清楚了…… C、检验实验结果的试剂选择不恰当 这个选项是对的，那么间接说明了可以找到能正确检验结果的试剂。

Answer 3

用碘液的话 有可能淀粉不完全水解 （PH会影响生物酶的活性 可能会使催化反应速度减慢但未完全失活 生物酶本质是蛋白质 蛋白质在50~65度的温度下不会失活） 应用斐林试剂（原理：它是由 A液 氢氧化钠的含量为0.1 g/mL的溶液和 B液 硫酸铜的含量为0.05 g/mL的溶液，（要混合使用）其本质是新配制的氢氧化铜 （新配制的氢氧化铜 被还原糖还原生成砖红色沉淀） 1：向试管内注入2mL待测组织样液。 　　2：向试管内注入1mL斐林试剂（甲乙液混合均匀，甲液量较多，乙液只需少量。然后再注入）。【人教版高一生物必修一第十八页说的是“甲乙液等量混合均匀后再注入】 　　3：将试管放入盛有50~65℃温水的大烧杯中加热约2min。 　　4：观察试管中出现的颜色变化。 　　核糖、葡萄糖、果糖均为砖红色沉淀；蔗糖、淀粉无变化。

追问

淀粉不完全水解，用碘液会出现什么情况？
是不变蓝吗？所以检验不出结果？
我知道斐林试剂的配法和用途，但是还是谢谢介绍了额~~

Answer 4

问题就是步骤不对
正确的步骤是先加可溶性淀粉，再酸化或者碱化，再加淀粉酶，最后显色。先加底物立即加酶，那么在没改变反应条件之前，酶反应已经发生了，这样的步骤是不合理的，无论是斐林试剂还是碘液

追问

步骤不对是吧……
我不想玩文字游戏，但我还是说一下……
C、检验实验结果的试剂选择不恰当 这个选项是对的，那么间接说明了可以找到能正确检验结果的试剂。如果是因为步骤不对，那么请问：在淀粉与淀粉酶反应过程中并无其他因素干扰，你能找出什么试剂来检验结果？而且检验的现象不一样能说明“pH对唾液淀粉酶活性有影响”这个实验目的？

追答

我怀疑是不是除了碘液以外还要用其他试剂来证明。。这个就复杂了，pH的改变也能引起糖苷键的断裂发生水解。。所以深追的话。。应该用标准的定性实验，拿个紫外，建个标准曲线，看看pH的改变到底降低多少酶活，这个就需要大学以后来学了，我觉得深究没意思，也许题目搞错了，斐林试剂用来鉴定糖，碘液用来鉴定淀粉，就这么回事了

追问

这是高考模拟题，你觉得深究没意思，可我必须要知道为什么！我要高考了好伐！
再说高考模拟题也没那么变态，要深究到那种程度。

Answer 5

用碘液是对的，正确的解释是 应该将第2步移到第5步前执行，（不然1.2步时 就已经反应了）。