Question

关于细胞培养的MTT法，高手请进。

查了文献是加100微升的细胞悬液培养一段时间，再加药物100微升，一段时间后加20微升的MTT（总体积1/10），我想问，加了100微升药物进去后，药物的浓度没有被原来那100微升培养基稀释么？那药物的浓度对实验影响还准确么？如果真的影响了，我要怎么做去避免影响呢？
另外我还想问，测得的OD值怎么算抑制率（求权威算法）。抑制率又怎么算IC50？

Answer 1

可以提高药物起始浓度。
做这种药物试验，一般都是要要做药物梯度实验的。
如果要算抑制率，得做空白对照组就是不加药物的细胞孔。用此孔OD减去实验组OD在除以空白对照OD,为了试验的准确性，每组药物浓度都是要做3个以上的副孔，算平均值。

Answer 2

当然稀释啦，所以药物浓度是最终的稀释浓度嘛，但你只要说明加进去的药物是多少不也一样么
OD值越高活细胞越多 1-药物处理的测出来的除以没加药物处理的不就是抑制率么

Answer 3

抑制率=（实验组-空白组）/(对照组-空白组)×100%，IC50有软件可以算出...想要的话留邮箱

Answer 4

建议做细胞增殖用 EdU方法，不要用MTT法。
因为MTT是做细胞活力，而EdU是做细胞增殖。