Question

什么是生物荧光标记法？荧光标记法在制药领域又有什么应用？

Answer 1

荧光标记法（Fluorescent Labeling）是利用荧光蛋白或荧光蛋白基因作为标志物对研究对象进行标记的分析方法。常用的荧光蛋白为绿色和红色两种，绿色荧光蛋白（GFP）常用的是来源于发光水母的一种功能独特的蛋白质，分子量为27kD，具有238个氨基酸，蓝光或近紫外光照射，发射绿色荧光。红色荧光蛋白来源于珊瑚虫，是一种与绿色荧光蛋白同源的荧光蛋白，在紫外光的照射下可发射红色荧光，有着广泛的应用前景。其中应用比较广泛的还是绿色荧光蛋白。2008年，美国加州大学圣迭戈分校生物化学及化学系教授、美国国家科学院院士钱学森堂侄钱永健，美国哥伦比亚大学生物学教授马丁·沙尔菲，日本有机化学家兼海洋生物学家下村修三人由于在绿色荧光蛋白上的贡献而获得化学诺贝尔奖，充分肯定了绿色荧光蛋白在生物研究中的重要地位。但如果应该标记的对象是，则常常是在5’-或3’-端标记荧光素（6-FAM），在荧光显微镜就能观察到现象。

荧光标记法作为探究生物不同生理过程的方法，与同位素示踪法的作用相似，但它有其后者所不能企及的优点。荧光标记法常用绿色荧光蛋白（GFP）为目标蛋白，通过转基因技术一起构建到载体上，可跟踪和判断生物细胞的分子变化。GFP相对较小，与其他蛋白融合后不影响自身的发光功能；基因序列比较短，可以进行高效转化；GFP基因没有物种特异性，在原核、酵母、植物以及动物细胞中都获得了成功表达，大量表达对细胞没有毒性；GFP发光是蛋白质本身发光，无需底物，且荧光稳定，适用于定量测定与分析。在科学研究中利用这些特性已经加深了我们对细胞内一些过程的了解，如细胞分裂、染色体复制和分裂、发育和信号转导等。绿色荧光蛋白不仅在细胞生物学与分子生物学领域得到广泛的关注和应用，而且经过修饰的绿色荧光蛋白基因还可作为生物探针，对哺乳动物细胞、酵母菌细胞及细菌进行活细胞的基因定位[1]。

http://blog.sina.com.cn/s/blog_55c51b950100vfaj.html
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Answer 2

荧光标记法也叫同位素标记法，