Question

检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的方法

Answer 1

还原糖的鉴定：
1、向试管内注入2ml待测组织样液。
2、向试管内注入1ml菲林试剂（甲液和乙液混合均匀后再注入）。
3、将试管放入盛有50-65摄氏度温水的大烧杯中加热约2分钟。
4、观察试管中出现的颜色变化。
脂肪的鉴定：
方法一：
1、向待测组织样液中滴加3滴苏丹三染液，观察样液被染色的情况。
方法二：
制作子叶临时装片，用显微镜观察子叶细胞的着色情况（以花生为例）
取材——取一粒浸泡过的花生种子，去掉种皮。
切片——用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片，放入盛有清水
的培养皿中待用。
制片——从培养皿中选取最薄的切片，用毛笔蘸取放在载玻片中央，在花
生子叶薄片上滴2-3滴苏丹三染液，染色3分钟（如果用苏丹四染
液，染色1分钟）；用吸水纸吸去染液，再滴加1-2滴体积分数为
50%的酒精溶液，洗去浮色，用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精，
滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片。
观察——在低倍物镜下找到花生子叶的最薄处，移到视野中央，将物像调
节清楚；换高倍物镜观察，视野中被染成橘黄色的脂肪颗粒清晰
可见。
蛋白质的检验：
1、向试管内注入2ml待测组织样液。
2、向试管内注入双缩脲试剂A液1ml，摇匀。
3、向试管内注入双缩脲试剂B液4滴，摇匀。
4、观察试管中出现的颜色变化。
现象：
还原糖：试管中出现砖红色沉淀。
脂肪：脂肪颗粒被苏丹三染液染成橘黄色（或被苏丹四染液染成红色）
蛋白质：试管中出现紫色。

Answer 2

糖类：1. 制备组织样液。

（≠组织液、≠细胞液）
苹果或梨组织液必须临时制备
因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，

将产生的颜色掩盖。

2.注入2mL组织样液。

3.注入1mL新制的斐林试剂，振荡。

（现配现用、先混后加）
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、

乙液等量混匀成斐林试剂；切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。
斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu ( OH ) 2在70-900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无

Cu ( OH ) 2生成。

4. 水浴加热：试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色 → 棕色 → 砖红色（沉淀）
最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者
脂肪的专业检测是用苏丹3染液染色，然后在显微镜下就可以看到被染成橘红色的脂肪滴。一般检测可以在吸水性较好的纸上轻按一下，会有油印子的。
检测蛋白质具体方法是： 先将双缩脲试剂A加入组织样液，摇荡均匀（必须营造碱性环境），在加入双缩脲试剂B，摇荡均匀。如果组织里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
双缩脲（NH2CONHCONH2）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。
双缩脲试剂本是用来检测双缩脲，因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质，与蛋白质接触后的颜色呈紫色。

Answer 3

检验还原性糖，试剂：班氏试剂，或者新制氢氧化铜。方法：试管滴入待测液，再滴入班氏试剂（或按待测液、NaOH、CuSO4顺序滴加），加热90°C或微沸，出现砖红色沉淀则为有还原性糖。
脂肪：通用方法使用苏丹染剂，多用苏丹III和苏丹IV染剂，试管滴入待测液，再滴入染剂，震荡，出现橘红色小油滴则为有脂肪。
蛋白质：通用双缩脲，或新制氢氧化铜（配法同还原性糖实验），试管滴入待测液，再滴入双缩脲或用新制氢氧化铜处理，震荡，溶液变蓝紫色则为有蛋白质。
顺便补一个淀粉，试管中待测液加碘液，一般实验室用革兰氏碘液，震荡溶液变紫色则为有淀粉。

Answer 4

检测还原性糖用菲林试剂变成砖红色，检测淀粉用碘液变成蓝色，检测脂肪用苏丹Ⅲ染液变橘黄色，或者用苏丹四染液，变红色。检测蛋白质用双缩脲试剂，变紫色

Answer 5

还原糖，菲林试剂。脂肪，苏丹三、苏丹四。蛋白质，双缩脲试剂。