Question

胰岛素原转变为胰岛素的过程是在哪里进行的

Answer 1

利用胰岛素RNA与E．coli大量生产胰岛素简述
一．\x09胰岛素rna的提：1.取材,目前,猪的胰岛素是应用最广泛的胰岛素（与人的胰岛素只相差一个氨基酸）,因此可以大量取材于猪的胰脏.2.提取,可以用裂解法提取rna.
二．\x09胰岛素rna的纯化：对于,大量的rna,利用有机溶剂抽取提法可以提纯,并且利用电泳法检.
三．\x09植入：提取的rna要与质粒融合导入E．coli中,因此,rna要通过逆转录成dna并且与质粒结合,导入E．coli.1．逆转录,逆转录所需要的原料是四种脱氧核苷酸即为：A,T,C,G.另外,还需要逆转录酶,在模拟环境下进行逆转录.通过逆转录,我们由胰岛素rna获得胰岛素的全部基因.2．质粒融合,先得用同样的限制性核酸内切酶处理质粒,产生和人胰岛素基因片段相同的黏性末端（也可能是平末端）,然后将两DNA分子用DNA连接酶结合在一起.关于运载体,首先需要有多处限制酶切点,然后还需要有一段标记基因,最后需要有能在受体细胞内稳定存在、自我复制并表达的能力.大肠杆菌内含质粒（独立于细菌本身的DNA,存在于细胞质内的小型环状DNA分子）,且满足以上条件.将组装好的质粒植入E．coli.
四．\x09复制：进入E．coli的质粒需要经过数次的复制才能在胞体内形成规模的,有效地应用的胞体.因此,我们需要把通过这些种方式获得胞体,经过数次的繁殖,获得需要的胞体.质粒在胞体内的复制是以A,T,C,G为原料,在dna聚合酶,以及dna解旋酶等酶的存在下进行的.dna的复制特点是　a,半保留复制,即母链解旋,并且以每一条子链为模板进行自我复制.b,双向复制,dna复制时,从起点向两个方向解旋形成复制叉,复制叉的两个方向同时复制.c,不连续复制,dna的复制总是沿着5＇～3＇端复制,因此,在复制叉中,总有一条子链（随从链）在其母链dna解旋到一定程度的时候,再的复制,然后再解旋,再复制,直到复制完毕.E．coli的复制方式还有边解旋边复制的特点.
五．\x09经过,数次的复制,我们得到了大量,且较纯净的含有猪胰岛素基因的E．coli.下一步就是让基因表达,就能得到大量的胰岛素.1,转录,E．coli的转录的以dna的一条子链为模板转录的.产物链从5＇～3＇端延续.转录的所需要的原料是核苷酸既：A,C,G,U.所需要的酶为dna解旋酶,rna聚合酶,rna连接酶,还需要启动因子,转录因子,启动因子,ρ因子等.2,翻转录的产物为mRNA,并移动到核糖体上进行翻译,翻译还需要一种rna成为转运rna（tRNA）．mRNA与核糖体结合以后,tRNA携带氨基酸与之结合,经过一系列的反应产生肽链,肽链经过加工修饰后变成具有活性的蛋白质,即胰岛素．
经过上述,可实现用胰岛素RNA与E．coli大量生产胰岛素.