用抗原免疫动物制备抗血清时,为什么要对动物多次免疫接种
用抗原免疫动物制备抗血清时,为什么要对动物多次免疫接种
用抗原免疫动物制备抗血清时,为什么要对动物多次免疫接种
抗原注射进入动物体内后,因为不是一个单独的分子,会随血液回圈输送到各处,也就会接触不同的免疫细胞。有些还会被抗原提呈细胞再加工。所以最后的结果是很多个免疫细胞都会接触到。一个抗原分子也有很多抗原表位。每个表位理论上都有能力启用一个B细胞转化为浆细胞。所以体内最后针对该抗原的必定是多克隆
由于动物个体差异的存在,同一抗原免疫同一种系不同个体的动物,产生的抗体的效价有很大的差异.与动物的年龄和营养状况密切相关.免疫用的动物最好选择适龄的健康雄性动物,雌性动物特别是妊娠动物用于制备免疫抗体则非常不合适,有时甚至不产生抗体.
先饲养观察7天其实就是等于隔离检疫,观察一下兔子的身体状况和是否带有其他传染病,淘汰体质多病的个体,防止在免疫过程中死亡或免疫应答不灵敏而不产生抗体.
抗原免疫动物制备血清,常用动物有哪些
以抗原免疫动物获得抗血清是制备抗体的经典方法。为了提高免疫效果,在免疫的时候,常辅以佐剂以改变抗原的物理状态而延长其在体内的滞留时间,使抗原缓慢释放,同时非特异性的促进区域性吞噬细胞反应来增强动物的免疫效果。佐剂的型别较多,目前常用的还是福氏佐剂(Freund’sAdjuvant,FA)。它是一种对大多数抗原都有效的佐剂,但由于它的一些副作用限制了它在实验动物上的使用。因此,福氏佐剂只能在确实需要的情况下(如使用的抗原为小分子可溶性抗原或半抗原)和强佐剂活性时使用。FA是用矿物油(石蜡油)、乳化剂(羊毛脂)和灭活的分枝杆菌(结核分枝杆菌或卡介苗)组成的油包水乳化佐剂。这三种成分俱全的佐剂称为福氏完全佐剂(Freund’sComD】eleAdjuvant,FCA),不含分枝杆菌的佐剂为福氏不完全佐剂(Freund’sInconrpleteAdjuvant,FIA)。石蜡油因不能代谢而存留在注射的部位,这就阻碍了抗原降解或快速反应,起到抗原储存作用,使抗原缓慢持续的释放,不断 *** 机体的免疫系统而产生免疫反应。乳化剂对于水溶性抗原与油稳定地乳化是必要的。分枝杆菌具有很强的免疫 *** 作用,可以非特异性的启用免疫系统。FCA用于基础注射,而FIA用于辅助注射以避免分枝杆菌蛋白引起的过敏反应。FA皮下注射或肌内注射可导致多种副作用,例如肉芽肿和无菌性脓肿的形成。腹腔注射引起腹膜炎。由于这些严重的副作用,FA不允许用于人或动物的疫苗接种免疫。传统的免疫方案,包括使用福氏佐剂和某些免疫程式,已不再被一些国家的权威机构所接受。据调查,在荷兰有64%的研究人员使用FCA,而且,用于多克隆抗体的生产方案差异很大。因此,在1993年,荷兰释出了利用动物免疫技术制备多克隆抗体的生产指南。主要规定了加强免疫注射的次数、免疫途径、注射量和佐剂的使用,并且支援使用替代佐剂来替换FCA。由于FCA给实验动物带来的严重的副反应,对它的使用提出了特别的限制,规定了(小鼠和大鼠sc:0.1nd;i.d:家兔0.o5rI1l;i.P:小鼠0.2nd)推荐使用量和注射途径。
制备免疫血清时为什么要多次免疫
单次免疫产生抗体浓度低,多次免疫抗体浓度高且持续时间长,同时产生的抗体亲和力高
为什么用抗原免疫动物制备的免疫血清一定要含有多克隆抗体
抗原注射进入动物体内后,因为不是一个单独的分子,会随血液回圈输送到各处,也就会接触不同的免疫细胞。有些还会被抗原提呈细胞再加工。所以最后的结果是很多个免疫细胞都会接触到。一个抗原分子也有很多抗原表位。每个表位理论上都有能力启用一个B细胞转化为浆细胞。所以体内最后针对该抗原的必定是多克隆
制备抗血清时,为何要多次接种?
免疫强化,增强免疫效果。单次免疫效果往往较差。通过多次免疫,从而保持抗原能在较长时间对免疫系统的 *** 。
免疫动物前为什么要乳化抗原在将抗原注射到动物体内
直接注射蛋白质抗原的免疫效果差。佐剂可以“唤醒”免疫系统,这样免疫系统对抗原的反应就会比较强烈。
制备抗血清是常用的免疫原有哪些
不是,我们平常接种的乙肝疫苗等,都是活疫苗,这叫作人工主动免疫。它本质是向人体注射无感染力的乙肝病毒使人产生相应的抗体。但如果注射抗体、血清、淋巴因子等,都是人工被动免疫,比如接狂犬疫苗是注射抗体的。总体上一般以接活疫苗为主,因为它能达到预防作用(物件是广大群众)。而接抗体是在抗原已进了人体之后才注射的,这样就立刻杀死抗原了(物件是被狗咬的人,等…)。而注射淋巴因子其物件只是细胞免疫缺陷的人。所以并不是以抗体血清为主要疫苗源,而是以活疫苗。
为什么要对实验小鼠进行抗原免疫处理
不用抗原处理,如何产生能够产生抗体的细胞?
为什么免疫组化要使用二抗动物来源作免疫血清
在免疫组化中用二抗同源的非免疫动物血清进行封闭的目的是为了减少非特异性结合.你所检测的标本是鼠的,如果你再用鼠的血清进行封闭的话,那么这个血清中就可能含有你所检测的目的蛋白,然后一抗就与之结合,干扰实验结果.而如果你用羊的血清进行封闭的话,那就起不到封闭的目的了,就是说就算这个封闭血清与一些非特异位点结合了,但是因为它是羊的,所以二抗同样会和它结合,进而出现假阳性的结果!所以最好用二抗同源的正常动物血清封闭