怎么才能把western blot 结果的条带弄漂亮点 我看文献上的很漂亮啊 我的怎么那么丑啊
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按照老师教你的步骤严格执行。要遵循一个道理，就是样品上样量，一抗，二抗浓度都要仔细认真的反复摸索，找出最合适的用量，要大胆地去尝试不同的实验条件，然后细心地总结。每换一个检测对象——蛋白或者抗体做western都会有不同的最适条件，这要靠你大量的摸索，慢慢的就上手了，以后基本上在你心中就会产生标尺，这是经验积累的结果。不过还有一点是起到决定性作用的，就是你的一抗质量要保证，有些一抗很烂，怎么弄效果也不好。
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做胶要用心，如果实验室有钱可以买precast gel，但是估计国内的实验室没有一个买的，其实最好是做完胶后放在4度冰箱过夜第二天用。跑胶是不要太快，转膜时电压不要太高，注意降温，最好在cold room或冰浴里转膜，国内主要用醋酸纤维膜，其实最好是PVDF膜，但是貌似老板都不舍得给买吧。上一抗时最好4度过夜，二抗就室温就可以了，抗体足量最好，可以让膜的各个地方充分均匀地孵育。显影的话有条件可以用仪器，用X光片的就比较痛苦了。 此外，后期处理也是很重要的，但是还是仅限于整体的调整吧，局部调整就成造假了...
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调对比度 洗膜的时候多洗一会 很多时候是抗体不够给力啦
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