Question

双缩脲法蛋白质定量有什么优缺点？

Answer 1

优点：测定速度较快，干扰物质少，不同蛋白质产生的颜色深浅相近。

缺点：

①灵敏度差； 

② 三羟甲基氨基甲烷、一些氨基酸和EDTA等会干扰该反应。

双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法，硫铵不干扰显色， Cu2+与蛋白质的肽键，以及酪氨酸残基络合，形成紫蓝色络合物，此物在540nm波长处有最大吸收。

扩展资料：

在使用双缩脲试剂时候，必须注意，必须是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液，再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。若先加入硫酸铜溶液，再加入氢氧化钠溶液，则无法充分制造碱性环境，此时硫酸铜会与氢氧化钠发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的。

参考资料来源：百度百科-蛋白质测定

Answer 2

双缩脲法
测定范围（μg/ml）1000—10000
不同种类蛋白的差异小
最大吸收波长(nm)540
特 点:
重复性、线性关系好，灵敏度低，测定范围窄，样品需要量大

Answer 3

缺点是反应不灵敏