碱裂解法提取质粒中的乙酸钾可以换成乙酸钠吗
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碱裂解法是提取质粒的最常用也最有效的方法,是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异达到分离目的. 原理：高pH使质粒DNA和染色体DNA变性,同时沉淀蛋白质.再将pH值调至中性,质粒DNA较小,很容易复性成双链.而染色体DNA较大,缠结成网状不溶物质,从而可以通过离心除去. 方法：依次加入下面三种溶液: 溶液1：葡萄糖 50 mmol/L,EDTA 100 mmol/L,Tris-Cl 25 mmol/L,溶菌酶5mg/ml,pH 8.0 溶液2：NaOH 0.2 mol/L,SDS 1% 溶液3：5 mol/L KAc 60 ml,冰乙酸 11.5 ml,重蒸水 28.5 ml 其中溶液1作用主要是悬浮菌体,溶液2作用是裂解菌体,释放胞内物质,溶液3是沉淀染色体DNA
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