帮忙看下一道分子生物学题
DesignanexperimentthatdetectseverytissueinahumanbodythatexperssesthecDNA(人奶中某种蛋白的cDNA...
Design an experiment that detects every tissue in a human body that expersses the cDNA(人奶中某种蛋白的cDNA) you cloned.
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题目要求您设计实验来检测人体中哪些组织能特异性表达您克隆的cDNA,也就是这个基因的表达。
大致设计如下:
1,设计引物,取各组织,做逆转录PCR,直接检查其mRNA的有无;
2,对于“express”的理解,我认为要包括蛋白质的最终表达,所以,用该蛋白的抗体,对各组织的匀浆物进行western blot 检验,以验证是否有该蛋白的最终表达。
以2者的结果为参考,最终判断该cDNA的表达与否。
当然,这个实验最难的是:到哪里取“人体”的各种组织?想到这个问题就胆寒……
大致设计如下:
1,设计引物,取各组织,做逆转录PCR,直接检查其mRNA的有无;
2,对于“express”的理解,我认为要包括蛋白质的最终表达,所以,用该蛋白的抗体,对各组织的匀浆物进行western blot 检验,以验证是否有该蛋白的最终表达。
以2者的结果为参考,最终判断该cDNA的表达与否。
当然,这个实验最难的是:到哪里取“人体”的各种组织?想到这个问题就胆寒……
追问
逆转录PCR不是检测mRNA的表达水平吗?
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