分离色素所用的试剂有哪些?
分离绿叶中的色素用层析液试剂。层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂,叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同:溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。
层析液的作用是溶解样品,作为样品的载体。例如,要分析A物质和B物质将其溶解于层析液中,由于是不同物质,其溶解能力和移动速度是不同的,所以可以在薄层板中得到明显的现象。
分离色素原理
纸层析法依据极性相似相溶原理,是以滤纸纤维的结合水为固定相,而以有机溶剂作为流动相。由于样品中各物质分配系数不同,因而扩散速度不同,从而达到分离的目的。
试样经层析后可用比移值(Rf)表示各组成成分的位置(比移值=原点中心至色谱斑点中心的距离与原点中心至流动相前沿的距离之比),由于影响比移值的因素较多,因此一般采用在相同实验条件下对照物质对比以确定其异同。
作为单体鉴别时,试样所显主色谱斑点的颜色(或荧光)与供置,应与对照(标准)样所显主色的谱点—队一定量的试样,经展开后,按各早体可将色谱斑点剪下洗脱标(纯度)检查时,可取一定量的试样。
经展开后,按各单体的规定,检视其所显杂质色谱斑点的个数或呈色(或荧光)的强度。作为含量测定时,可将色谱斑点剪下洗脱后,再用适宜的方法测定,也可用色谱扫描仪测定。
2020-06-17 广告