高效液相色谱中理论塔板数的计算方法
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理论塔板数=5.54(保留时间/半高峰宽)2 (2是平方)。
理论塔板数用于定量表示色谱柱的分离效率,N取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。如果峰形对称并符合正态分布,N可近似表示为N=(tR/σ)2=16(tR)2/W =5.54(tR/W1/2)2。
W表示峰宽,σ表示曲线拐点处峰宽的一半,即峰高0.607处峰宽的一半,N为常量时,W随tR成正比例变化。在一张多组分色谱图上,如果各组份含量相当,则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽,峰高则逐渐降低。
效液相色谱HPLC分析注意事项
用0.2μm滤纸拍卜漏过滤溶剂或流动相,并进行超声脱气。
启动时应采用色谱级水清洗色谱柱,有助于延长色谱柱的使用寿命、检测器的稳定运行,确保检测结果的准确性。
通过软件监视各项读数,当检测器袭烂检测到样品所有峰值,停止运行并设置新的进样。在下一个样品分析前,建弊雹议留出5-10分钟,待流动相通过色谱柱,以便清洗之前样品的残留物,确认基线稳定后,进行下一次注射。
以上内容参考 百度百科-高效液相色谱、百度百科-理论塔板数
哈美顿(上海)实验器材有限公司
2024-11-20 广告
2024-11-20 广告
色谱柱可没有固定的理论塔板数。 理论塔板数=5.54(保留时间/半高峰宽)2 (2是平方),也就是说理论塔板数必须要进样分析之后,根据样品的半峰宽、保留时间等参数计算出来的。 如果你有色谱柱的出厂检验报告,上面应该会有标物分析的图谱。图谱上...
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⊕理论塔板数(theoretical plate number,N)用于定量表示色谱柱的分离效率(简称柱效)。
N取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。如果峰形对称并符合正态分布,N可近似表示为:
N=(tR/σ)2=16(tR)2/W =5.54(tR/W1/2)2
W:峰宽凳扒 ; σ:曲线拐点处峰宽的一半,即峰高0.607处峰宽的一半。
N为常量时,W随tR成正比例变化。在一张多组分色谱图上,如果各组份含量枣闭昌相当,则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽,峰高则逐渐降低。
用半峰宽计算理论塔板数比用峰宽计算更为方便和常用,因为半峰宽更容易准确测定,尤其是对稍有拖尾的峰。
N与柱长成正比,柱越长,N越大。用N表示柱效时应注明柱长,,如果未注明,则表示柱长为1米时的理论塔板数。(一般HPLC柱的N在1000以上。)
若用调整保留时间(tR’)计算理论塔板数,所得值称为有效理论塔板数(N有效或Neff)=16(tR’/W)2
⊕理论塔板高度(theortical plate height,H)每单位柱长的方差。H=。实际应用时往往用柱长L和理论塔板数计算:H=L/N
在实际应用中能达态租到分离完全就可以了,塔板数超过会增加试验的时间,试验效率就会降低。
N取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。如果峰形对称并符合正态分布,N可近似表示为:
N=(tR/σ)2=16(tR)2/W =5.54(tR/W1/2)2
W:峰宽凳扒 ; σ:曲线拐点处峰宽的一半,即峰高0.607处峰宽的一半。
N为常量时,W随tR成正比例变化。在一张多组分色谱图上,如果各组份含量枣闭昌相当,则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽,峰高则逐渐降低。
用半峰宽计算理论塔板数比用峰宽计算更为方便和常用,因为半峰宽更容易准确测定,尤其是对稍有拖尾的峰。
N与柱长成正比,柱越长,N越大。用N表示柱效时应注明柱长,,如果未注明,则表示柱长为1米时的理论塔板数。(一般HPLC柱的N在1000以上。)
若用调整保留时间(tR’)计算理论塔板数,所得值称为有效理论塔板数(N有效或Neff)=16(tR’/W)2
⊕理论塔板高度(theortical plate height,H)每单位柱长的方差。H=。实际应用时往往用柱长L和理论塔板数计算:H=L/N
在实际应用中能达态租到分离完全就可以了,塔板数超过会增加试验的时间,试验效率就会降低。
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