质粒在基因工程中的作用是什么?
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利穗科技
2024-04-23 广告
2024-04-23 广告
质粒裂解系统是一种高效的生物技术工具,用于从细菌中提取质粒DNA。该系统基于特定的裂解缓冲液和蛋白酶,能够快速、选择性地破坏细菌细胞壁和细胞膜,释放质粒DNA。与传统的煮沸法或碱裂解法相比,质粒裂解系统具有更高的提取效率和纯度,操作简便,节...
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在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。人工构建的质粒可以集多种有用的特征于一体,如含多种单一酶切位点、抗生素耐药性等。常用的人工质粒运载体有pBR322、pSC101。pBR322含有抗四环素基因(Tcr)和抗氨苄青霉素基因(Apr),并含有5种内切酶的单一切点。如果将DNA片段插入EcoRI切点,不会影响两个抗生素基因的表达。但是如果将DNA片段插入到Hind III、Bam H I 或 Sal I切点,就会使抗四环素基因失活。这时,含有DNA插入片段的pBR322将使宿主细菌抗氨苄青霉素,但对四环素敏感。没有DNA插入片段的pBR322会使宿主细菌既抗氨苄青霉素又抗四环素,而没有pBR322质粒的细菌将对氨苄青霉素和四环素都敏感。pSC101与pBR322相似,只是没有抗氨苄青霉素基因和PstI切点。质粒运载体的最大插入片段约为10 kb(kb表示为千碱基对)。
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质粒是载体,可以与目的基因结合进入细胞
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作用是载体
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