Question

聚丙烯酰胺凝胶电泳的问题，急！！！

用聚丙烯酰胺凝胶电泳测小麦幼苗中的过氧化物中同工酶，用溴酚蓝当指示剂，最后用二苯胺和抗坏血酸显色。我上课没仔细听，有好多疑问啊：1凝胶点样点和最下面的蓝色是溴酚蓝遇到二苯胺显得色吗。2.同工酶的条带在哪里啊？3.电泳的时候溴酚蓝指示的条带不水平，是什么原因啊？

Answer 1

溴酚蓝本身就是蓝色的，不用再显色，所以才能做指示剂。
二苯胺和抗坏血酸显色后出现的就是同功酶的条带了，这是利用酶的催化作用产生的颜色，其他蛋白不会显示出来。
溴酚蓝指示的条带不水平，可能原因很多，比如胶聚合不均匀，电泳电压过大，样品或点样缓冲液有问题等等都有可能。

追问

能不能告诉我，二苯胺和抗坏血酸是怎么显色的？

追答

二苯胺是底物，可被氧化产生有色物质，用于显色。