Question

自己设计了一个实验是从土壤中分离及筛选产纤维素酶菌，结果培养了36小时平板上一个菌也没长出来为什么啊

实验器材及药品：
选择培养基：KH2PO4 0.5g, MgSO4 0.5g, (NH4)2SO4 5g, CMC-Na 2g, 琼脂20g,
刚果红（10mg/ml配制灭菌后按1ml CR/200ml培养基加入），PH=自然
定容1000ml.
高压灭菌锅，摇床，恒温培养箱，500ml三角瓶，培养皿，移液枪及枪头，试管及试管架，酒精灯等。

实验步骤：1、在底物富集的地方（土下10cm）采土样20g于三角瓶中加水后放入摇床中摇40min.
2、将培养基及刚果红（CR）溶液配制好后和枪头，培养皿、各装有10ml水的试管放入灭菌锅中121℃下灭菌 20min。
3、将CR溶液倒入培养基中后再倒平板。
4、用移液枪将土样吸取0.2ml菌悬液到无菌水中，一次梯度稀释到10-1 —10-7 。
5、涂布10-4—10-7的菌悬液后37℃下培养24h。
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因为一些原因导致 氮源用硫酸铵，是否需要用有机氮混合搭配？
PH搞忘调了，悲剧啊 原本想的是7 可0.几的盐能改变PH吗
刚果红溶液是培养前加入的 是否是待菌长出来后再加啊？
培养温度正确吗？？？？？

Answer 1

确实，同楼上所讲，你的培养基里面没有碳源，细菌是没法生长的。

Answer 2

you know!因为要想筛选出纤维素酶菌，是依靠纤维素酶菌能靠纤维素酶分解纤维素来提供自生能量的，所以你的实验的要加纤维素来作唯一能量源！而你的实验中没有能量源，刚果只是仅仅够检测，筛选

Answer 3

明显有CMC-Na啊，是碳源哦！你们搞什么？