Question

PCR与细胞内DNA复制的异同

分子生物学

Answer 1

1、体内复制的过程不同：

PCR在扩增DNA的时候也会经历DNA双链的解开（变性），寡聚核酸与单链DNA的结合（退火），以及DNA聚合酶开始合成DNA（延伸）的三个过程。

DNA的复制整个过程是由一系列酶所控制的，所以像DNA解链等在体温下就可以完成。

2、寡聚核酸需求不同：

DNA的合成都需要一小段寡聚核酸作为引物提供3‘羟基末端，以让DNA聚合酶识别并开始合成DNA。在体内这个3’羟基末端是由寡聚的RNA提供；

PCR中由寡聚的DNA提供，因为DNA分子比RNA分子稳定易于储藏和使用。在体内双链DNA聚合方向是5‘-3’的，其中一条链是5‘-3’，而另外一条链虽然也是5‘-3’，但它是由冈崎片段连接起来的，而总体的合成方向是3‘-5’。

在体内，DNA聚合是从复制起始位点开始的，由聚合酶识别复制起始位点。而在PCR反应中，DNA的聚合是从引物结合处开始的，主要是由引物的特异性来控制复制的起始位置。

扩展资料

PCR原理：

DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。

在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。

但是，DNA聚合酶在高温时会失活，因此，每次循环都得加入新的DNA聚合酶，不仅操作烦琐，而且价格昂贵，制约了PCR技术的应用和发展。

耐热DNA聚合酶-Taq酶的发现对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

参考资料：百度百科-DNA复制

参考资料：百度百科-PCR

Answer 2

PCR实际上是在体外模拟DNA体内复制的过程。和体内DNA复制一样，PCR在扩增DNA的时候也会经历DNA双链的解开（变性），寡聚核酸与单链DNA的结合（退火），以及DNA聚合酶开始合成DNA（延伸）的三个过程。但PCR和体内DNA复制不同，在体内DNA的复制整个过程是由一系列酶所控制的，所以像DNA解链等在体温下就可以完成。而PCR则需要一个高温来完成DNA的解链，所以PCR反应的DNA taq聚合酶是耐高温的酶。此外，无论体内或者PCR反应，DNA的合成都需要一小段寡聚核酸作为引物提供3‘羟基末端，以让DNA聚合酶识别并开始合成DNA。在体内这个3’羟基末端是由寡聚的RNA提供，而在PCR中则由寡聚的DNA提供，因为DNA分子比RNA分子稳定易于储藏和使用。在体内双链DNA聚合方向是5‘-3’的，其中一条链是5‘-3’，而另外一条链虽然也是5‘-3’，但它是由冈崎片段连接起来的，而总体的合成方向是3‘-5’。在PCR反应中，每一条链的合成方向都是5‘-3’，没有类似冈崎片段的东西。在体内，DNA聚合是从复制起始位点开始的，由聚合酶识别复制起始位点。而在PCR反应中，DNA的聚合是从引物结合处开始的，主要是由引物的特异性来控制复制的起始位置。基本上就是这样了。

Answer 3

同意“法师药材店”的回答，PCR实际上是在体外模拟DNA体内复制的过程。体外PCR是由PCR仪完成的，而体内DNA复制是由体内的一系列酶控制完成的。