做western blot时内参抗体如何选择？
比如针对目的蛋白，我的一抗是小鼠来源的，二抗是山羊抗小鼠的；针对内参β-actin的抗体如何选择呢？我可以直接选择小鼠来源的HRP抗体吗？选择小鼠来源的一抗，二抗用上面山...
比如针对目的蛋白，我的一抗是小鼠来源的，二抗是山羊抗小鼠的；针对内参β-actin的抗体如何选择呢？我可以直接选择小鼠来源的HRP抗体吗？选择小鼠来源的一抗，二抗用上面山羊抗小鼠的抗体可以吗？不懂啊，求解答！选择抗体的依据或者标准是什么啊？
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1个回答
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搞不太清楚你想说什么。内参抗体一般选择 β-actin，GAPDH。hsp90也OK。一般内参抗体都是鼠源的啊。既然一抗是鼠源，二抗是接HRP的羊抗鼠就很好理解啊。
追问
大侠留步，请问目的蛋白的一抗为鼠源，二抗为羊抗鼠
内参的一抗为鼠源，二抗为羊抗鼠
那么，他俩可以共用二抗吗？
追答
只要你的目的蛋白分子量和内参的分子量不接近。就可以一起敷一抗和二抗
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上海欧易
2025-02-24 广告
western blot中蛋白样品调节浓度有很多方法 先检测出各个蛋白样品的浓度，根据体积通过不同单位的Loading bufer将样品稀释成不同的体积，即可以保证各个蛋白样品浓度一致 或者在样品裂解的时候，用裂解液或者PBS去稀释蛋白样品...
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