基因工程中用限制酶切割质粒和目的基因用一种限制酶和两种限制酶是否都可以？各有何优缺点？
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不可以，只能用同一种限制酶来切割质粒和目的基因。原因是，用同一种限制酶来切割，可以产生相同的黏性未端，如果用两种限制酶切割，产生的黏性未端一般不相同。
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AmBeed
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用一种来切的话你插入的目的基因没法确定方向 因为两头都可以连上
用两种来切的话就可以保证你插入序列的方向性
用两种来切的话就可以保证你插入序列的方向性
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